[發明專利]一種合成西那普肽的方法

有效

• 申請號: 201510274315.X
• 申請日: 2015-05-26
• 公開（公告）號: CN104817631B
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發明（設計）人: 文永均;郭德文;董華建;曾德志
• 申請（專利權）人: 成都圣諾生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 趙青朵

技術領域

本發明涉及醫藥合成領域，具體涉及一種合成西那普肽的方法。

背景技術

西那普肽是一種人工設計的21肽，于2012年3月被美國FDA批準上市，臨床用于治療新生兒呼吸窘迫綜合征，其氨基酸肽序如下：

H-Lys¹-Leu²-Leu³-Leu⁴-Leu⁵-Lys⁶-Leu⁷-Leu⁸-Leu⁹-Leu¹⁰-Lys¹¹-Leu¹²-Leu¹³-Leu¹⁴-Leu¹⁵-Lys¹⁶-Leu¹⁷-Leu¹⁸-Leu¹⁹-Leu²⁰-Lys²¹-OH

新生兒呼吸窘迫綜合征，又稱新生兒肺透明膜病，指新生兒出生后不久即出現進行性呼吸困難和呼吸衰竭等癥狀，主要是由于缺乏肺泡表面活性物質所引起，導致肺泡進行性萎陷，患兒于生后4～12小時內出現進行性呼吸困難、呻吟、發紺、吸氣三凹征，嚴重者發生呼吸衰竭。發病率與胎齡有關，胎齡越小，發病率越高，體重越輕病死率越高。

現有關于西那普肽的合成方法國內外均有報道。美國專利US5260273采用基因工程進行制備，該方法工藝成本較高且繁瑣。限制了西那普肽的生產效率。為此，我國專利CN102850440A以及CN104098656A均公開了一種西那普肽的合成方法，以此降低成本和工藝繁瑣程度。其中CN104098656A公開的是按照西那普肽C端到N端的肽序逐一合成的技術方案，但是這種合成策略一方面周期長，另一方面總收率較低，為47.9％；CN102850440A公開了一種片段合成策略，但是根據其記載的技術方案合成的多肽和最終的西那普肽并不一致，而且其總收率更低，僅為40％。

不同的合成策略對最終產品的純度、雜質含量和收率有很大影響，如何在保證純度和收率的前提下，盡可能的降低合成工藝的復雜程度、雜質以及縮短合成周期，是當下技術人員的研究重點。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種合成西那普肽的方法，使得本發明所述方法能夠顯著提高西那普肽合成的總收率，并保證西那普肽具有較高純度和較低的單一雜質含量，同時縮短合成周期。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種合成西那普肽的方法，包括以下步驟：

步驟1、將保護的Lys與樹脂偶聯，獲得在Lys的N端及其側鏈上偶聯有保護基、在其C端偶聯有樹脂的肽樹脂1；

步驟2、將在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶聯有保護基的多肽片段1的C端與肽樹脂1的N端進行偶聯，而后將保護的Lys再與片段1的N端偶聯，獲得在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列N端、Lys側鏈上偶聯有保護基，在C端偶聯有樹脂的肽樹脂2；

步驟3、將在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶聯有保護基的多肽片段1的C端與肽樹脂2的N端進行偶聯，而后將保護的Lys再與片段1的N端偶聯，獲得在SEQ ID NO:3所示氨基酸序列N端、Lys側鏈上偶聯有保護基，在C端偶聯有樹脂的肽樹脂3；

步驟4、將在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶聯有保護基的多肽片段1的C端與肽樹脂3的N端進行偶聯，而后將保護的Lys再與片段1的N端偶聯，獲得在SEQ ID NO:4所示氨基酸序列N端、Lys側鏈上偶聯有保護基，在C端偶聯有樹脂的肽樹脂4；

步驟5、將在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端偶聯有保護基的多肽片段1的C端與肽樹脂4的N端進行偶聯，而后將保護的Lys再與片段1的N端偶聯，獲得在SEQ ID NO:5所示氨基酸序列N端、Lys側鏈上偶聯有保護基，在C端偶聯有樹脂的西那普肽樹脂；

步驟6、西那普肽樹脂酸解脫除C端樹脂和所有保護基得到西那普肽粗品，粗品純化轉醋酸鹽，獲得西那普肽成品。