[發明專利]一種以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法

有效

• 申請號: 201510273998.7
• 申請日: 2015-05-25
• 公開（公告）號: CN104849243A
• 公開（公告）日: 2015-08-19
• 發明（設計）人: 肖琦;黃珊;盧雙燕
• 申請（專利權）人: 廣西師范學院
• 主分類號: G01N21/63
• 分類號: G01N21/63
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 靳浩

技術領域

本發明涉及血紅蛋白的檢測，具體涉及一種以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法。

背景技術

血紅蛋白大量存在于紅細胞中，是血液中運輸氧氣的主要成分，在生物體內起到傳輸氧氣、分解H₂O₂、傳遞電子等與氧和能量代謝有關的重要活動，在一切生命活動中起著關鍵作用。血紅蛋白的測定方法有可見光度法、化學發光法及電化學法。本文通過微波法合成了水溶性的碳量子點，該碳量子點可以與血紅蛋白結合，從而實現對血紅蛋白含量的測定。

近年來，碳點是繼富勒烯、碳納米管及石墨烯之后最熱門的碳納米材料之一。這種納米材料克服了傳統量子點的某些缺點，不僅具有優良的光學性能與小尺寸特性，而且具有良好的生物相容性，易于實現表面功能化，在生化傳感、成像分析、環境檢測、光催化技術及藥物載體等領域具有很好的應用潛力。但迄今為止，將碳點探針用于血紅蛋白檢測的相關報道仍未見。

光散射現象廣泛存在于光與粒子的作用過程中，是指當光通過介質時在入射光方向以外的各個方向上所觀察到的光現象。它源于光電磁波的電場振動而導致的分子中電子產生的受迫振動所形成的偶極振子。根據電磁理論，振動著的偶極振子是一個二次波源，它向各個方向發射的電磁波就是散射波。光散射與介質的不均勻性有關，除了真空之外的其它所有介質都有一定程度的不均勻性，從而產生散射光。如今，共振光散射技術逐步發展成為一門新的分析技術。該技術具有簡便、快速，靈敏度高，儀器操作方便等優點。近年來已被成功應用于核酸、蛋白質、無機離子、免疫和藥物等的分析測定。

針對以上問題，我們研究了一種利用碳點探針共振散射光檢測血紅蛋白的方法，該方法操作簡單、檢測快速且靈敏度高，能進行溶液中血紅蛋白的高靈敏識別。

發明內容

本發明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是提供一種以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，操作簡單、檢測快速，能進行溶液中血紅蛋白的高靈敏識別。

本發明還有一個目的是提供碳點的制備方法。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了一種以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，向多份血紅蛋白標準溶液和待測溶液中分別加入碳點，分別檢測各血紅蛋白標準溶液和待測溶液的共振光散射強度，建立各標準溶液的共振光散射強度與血紅蛋白濃度為零的標準溶液的共振光散射強度的差值和血紅蛋白的濃度間的線性關系，根據該線性關系計算待測溶液中血紅蛋白的濃度。

優選的是，所述的以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，具體包括以下步驟：

步驟1、配制多份不同濃度的血紅蛋白溶液，向各份血紅蛋白溶液中分別添加碳點，并使各份血紅蛋白溶液中的碳點的濃度相同，得到多份不同濃度的血紅蛋白的標準溶液，分別檢測各份標準溶液的共振光散射強度，得到各份標準溶液的共振光散射光譜圖；

步驟2、以每份標準溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應的共振光散射強度與血紅蛋白濃度為零的標準溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應的共振光散射強度的差值為縱坐標，以每份標準溶液中血紅蛋白的濃度為橫坐標，繪制標準曲線并計算線性關系；

步驟3、向待測溶液中加入碳點，使得待測溶液中的碳點的濃度與各份標準溶液中碳點的濃度相同，并按照步驟2的方法得到待測溶液對應的共振光散射光譜圖，將該共振光散射光譜圖中所選定波長對應的共振光散射強度與血紅蛋白濃度為零的標準溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應的共振光散射強度的差值代入到步驟3得到的線性關系中，即可得到待檢測溶液中血紅蛋白的濃度。

優選的是，所述的以碳點為探針運用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，所述碳點的制備方法：

步驟1.1、將分子量為1500的聚乙二醇和甘油攪拌后置于微波反應器中，設定微波反應器的溫度為140℃，反應時間為15min；

步驟1.2、將步驟1.1中的樣品冷卻到50℃時加入絲氨酸，繼續升溫至180℃微波反應10min；

步驟1.3、將步驟1.2中制得的樣品注入分子量為1000的透析袋中透析24小時，保留透析袋外的液體，得透析液；

步驟1.4、將所述透析液在60℃恒溫的條件下旋轉蒸發一個小時，得碳點；

其中，每1g分子量為1500的聚乙二醇需要甘油的量為15ml，需要絲氨酸的量為1g。