[發明專利]用于培養苯并芘降解菌的培養基及其培育方法

在審

• 申請號: 201510270404.7
• 申請日: 2015-05-26
• 公開（公告）號: CN105039169A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 李軍;弓玉紅;白鳳鳳
• 申請（專利權）人: 呂梁學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/77
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于焦化廠污染物降解技術領域，具體涉及一種苯并芘降解菌的培養基及其本降解菌的培育方法。

背景技術

苯并芘，分子式為C₂₀H₁₂，分子量是252，極不易溶于水，這是其在環境中難于被降解的因素之一。苯并芘是一種強致癌物，具有致癌、致畸、致突變性。苯并芘存在于石油、食品、大氣和煤焦油中，在土壤中也容易殘留。許多國家都進行過土壤中苯并芘含量調查，殘留濃度取決于污染源的性質與距離，在焦化廠附近土壤含量為200mg/kg，在污染的土壤中，可高達650mg/kg。苯并芘對眼睛、皮膚有刺激作用，是致癌物、致畸原及誘變劑，若不能將苯并芘降解，會影響周圍居民的身體健康，甚至會造成更加嚴重的危害。

發明內容

本發明克服現有技術存在的不足，旨在提供一種苯并芘降解菌的培養基及其降解菌的培育方法，得到的降解菌降解能力強，對苯并芘的降解率可達50%左右，在苯并芘污染的微生物修復上具有很高的應用價值。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：用于培養苯并芘降解菌的培養基，包括富集培養基和2216E培養基，所述富集培養基的原料的具體配比為：

（NH₄）₂SO₄0.3~0.5g，NaNO₃0.3~0.5g，CaCl₂0.01~0.02g，KH₂PO₄0.5~1.0g，NaH₂PO₄0.5~1.0g，MgSO₄0.1~0.2g，溶解苯并芘5~10mg于丙酮后加水至1L，pH值7.5；

2216E培養基的原料具體配比為：蛋白胨5~8g，酵母浸膏1~2g，磷酸高鐵0.01~0.02g，加水至1L，pH值7.6～7.8。

其中，作為優選地，所述富集培養基的原料的具體配比為：

（NH₄）₂SO₄0.3g，NaNO₃0.3g，CaCl₂0.01g，KH₂PO₄0.5g，NaH₂PO₄0.5g，MgSO₄0.1g，溶解苯并芘5mg于丙酮后加水至1L，pH值7.5；

2216E培養基的原料具體配比為：蛋白胨5g，酵母浸膏1g，磷酸高鐵0.01g，加水至1L，pH值7.6～7.8。

其中，作為優選地，所述富集培養基的原料的具體配比為：

（NH₄）₂SO₄0.5g，NaNO₃0.5g，CaCl₂0.02g，KH₂PO₄1.0g，NaH₂PO₄1.0g，MgSO₄0.2g，溶解苯并芘10mg于丙酮后加水至1L，pH值7.5；

2216E培養基的原料具體配比為：蛋白胨8g，酵母浸膏2g，磷酸高鐵0.02g，加水至1L，pH值7.8。

其中，作為優選地，所述富集培養基的原料的具體配比為：

（NH₄）₂SO₄0.4g，NaNO₃0.4g，CaCl₂0.015g，KH₂PO₄0.8g，NaH₂PO₄0.8g，MgSO₄0.15g，溶解苯并芘8mg于丙酮后加水至1L，pH值7.5；

2216E培養基的原料具體配比為：蛋白胨6g，酵母浸膏1.5g，磷酸高鐵0.015g，加水至1L，pH值7.7。

用于培養苯并芘降解菌的分解方法，具體操作步驟如下：

一、取被苯并芘污染的土樣和水樣的混合物加入到90mL無菌水中，加入適量玻璃珠，振蕩3h；

二、經30min靜置后，取5mL上清液到45mL的無機鹽培養基中，培養基中的苯并芘濃度為1mg/L，培養溫度為28℃，以頻率150r/min搖床避光培養；