[發明專利]一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒在審

申請號：	201510268536.6	申請日：	2015-05-22
公開（公告）號：	CN104965077A	公開（公告）日：	2015-10-07
發明（設計）人：	王明麗;洪葉;趙俊;劉峰	申請（專利權）人：	必歐瀚生物技術（合肥）有限公司;劉峰
主分類號：	G01N33/543	分類號：	G01N33/543;G01N33/573;G01N21/76
代理公司：	安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112	代理人：	余成俊
地址：	230088 安徽省合肥市高***	國省代碼：	安徽;34
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種胃蛋白酶化學發光檢測試劑盒
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【說明書】：

技術領域

本發明屬免疫檢測分析技術領域，尤其涉及一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒。

背景技術

該測試用于診斷嚴重萎縮性胃體胃炎，以及提示早期胃癌風險。血清或血漿PGI(P-PGI,S-PGI)檢測法是檢測嚴重萎縮性胃體胃炎的一種可靠方法，其敏感性和特異性分別為92％和90％。

胃蛋白酶原(Pesinogen,PG)是胃液中胃蛋白酶的無活性前體，由胃體的主細胞和黏液細胞分泌。大部分分泌到胃腔，少量可在血液中被檢測到。PGI水平與胃體黏膜主細胞的數量具有可靠相關性。血清PG水平反映了不同部位胃黏膜的形態和功能：PG?Ⅰ是檢測胃泌酸腺細胞功能的指標，胃酸分泌增多PG?Ⅰ升高，分泌減少或胃黏膜腺體萎縮PG?Ⅰ降低；PG?Ⅱ與胃底黏膜病變的相關性較大(相對于胃竇黏膜)，其升高與與胃底腺管萎縮，胃上皮化生或假幽門腺化生、異型增值有關：PG?Ⅰ/Ⅱ比值進行性降低與胃黏膜萎縮進展相關。因此，聯合測定PG?Ⅰ和PG?Ⅱ比值可起到胃底腺黏膜“血清活檢測”的作用。

化學發光技術興起于上個世紀80年代是繼酶聯免疫技術和放免技術后發展起來的新興技術，由于其高靈敏度、高特異性，同時方法簡便、快速，標記結合物穩定，無放射同位素損傷和污染等特點，在近些年得到了飛速發展。化學發光的原理是在化學反應中生成的不穩定的激發態中間體，當其回到基態時，釋放光子。在免疫檢測分析中，使用化學發光技術，可以使檢測范圍達到6個數量級，而且靈敏度很高，加上標記物穩定，有效期長，使其受到越來越多的關注與應用。磁微粒分離酶聯免疫檢測技術是一種以磁性微粒為固相分離載體，將免疫磁微粒分離技術與酶聯免疫技術相結合而建立的一種新型免疫檢測方法。傳統ELISA方法，抗原，抗體的結合反應是在固相(ELISA板反應孔)表面進行的，而磁分離酶聯免疫檢測方法，抗原、抗體的結合反應也在近似液相的條件下進行，因而反應快速，徹底。與傳統ELISA相比具有自動化程度高、靈敏度高、檢測用時少的優點。但目前市場上檢測PG?Ⅰ試劑盒主要以傳統ELISA法為主。

發明內容

本發明需要解決的技術問題在于提供一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒，使對人胃蛋白酶原Ⅰ檢測實現了自動化、高特異性和靈敏度。

一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括酶標液、胃蛋白酶原Ⅰ標準品、包被胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體的免疫磁珠、樣本稀釋液、化學發光底物液、洗滌液。

所述的一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒，其特征在于，將胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體包被在磁珠微球表面，經捕捉樣本中的胃蛋白酶原Ⅰ以及加入酶標胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體試劑后，形成固相-抗體-抗原-酶標抗體夾心免疫復合物。

所述的一種胃蛋白酶原Ⅰ酶促化學發光檢測試劑盒，其特征在于，所述的包被胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體的免疫磁珠為含有標記有抗胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體的磁性微球；

所述的酶標液中酶標抗體的酶是辣根過氧化物酶；

所述的洗滌液是含有吐溫-20的緩沖液；

所述的化學發光底物溶液是酶促化學發光底物溶液。

任其一所述的試劑盒，其特征在于，所述包被胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體的免疫磁珠按如下方法制得：

(1)初洗緩沖液的配制：

稱取0.1952g的MES?hygrate于100ml的純水中，調整pH至5.0；

加入50μl吐溫-20，配成0.01mol/L?MES緩沖液，調整pH至5.0；