[發明專利]Hsa?miR?3200?5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 201510266985.7
• 申請日: 2015-05-22
• 公開（公告）號: CN104878012B
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 肖建如;陳素;矯健;周振華;姜東杰
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙)31268
• 代理人: 趙青

1.miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述的Brachyury陽性腫瘤是指肺癌。

2.根據權利要求1所述的miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述的Brachyury陽性腫瘤是指該腫瘤中Brachyury呈現出高水平的表達。

3.根據權利要求1至2任一所述的miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述的試劑是指檢測所述的microRNAs表達量的寡聚核苷酸；所述的試劑盒是指包含檢測所述的microRNAs表達量的寡聚核苷酸。

4.根據權利要求3所述的miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，檢測所述的microRNAs表達量的寡聚核苷酸包括反轉錄引物、PCR特異性引物。

5.根據權利要求3所述的miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，檢測所述的microRNAs表達量的寡聚核苷酸序列包含如SEQ ID NO:2的序列。

6.根據權利要求4或5所述的miR-3200-5p在制備早期篩查或診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述試劑盒包括以下組分：

A.Real-Time PCR擴增特異性上游引物，如SEQ ID NO:2所示，1管，10μM濃度，100μL/管；

B.Real-Time PCR擴增通用反向下游引物，如SEQ ID NO:3所示，1管，10μM濃度，100μL/管；

C.正常標準品，1管，10μM濃度，100μL/管。

7.檢測miR-3200-5p表達量的寡聚核苷酸序列在制備診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述的寡聚核苷酸序列包含如SEQID NO:2的序列，所述的Brachyury陽性腫瘤是指肺癌。

8.根據權利要求7所述的檢測miR-3200-5p表達量的寡聚核苷酸序列在制備診斷Brachyury陽性腫瘤試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，利用所述的寡聚核苷酸檢測miR-3200-5p表達量的方法包括如下步驟：

取樣本中的總RNA，加入反轉錄引物、5×PrimeScript Buffer、PrimeScript RT Enzyme Mix I、RNase Free dH₂O反轉錄成cDNA，應用EASY Dilution稀釋試劑盒中的正常標準品，以所反轉錄的cDNA為模板向反應體系中加入PCR特異性引物，通過反轉錄聯合聚合酶鏈式反應檢測miR-3200-5p的表達量。