[發明專利]一種載有普伐他汀鈉的血管組織工程支架材料的制備方法

有效

• 申請號: 201510260315.4
• 申請日: 2015-05-19
• 公開（公告）號: CN104841014B
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 盧玲;馮婕;劉瑞源;劉中秋;游文瑋;席華松
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學
• 主分類號: A61L27/26
• 分類號: A61L27/26;A61L27/24;A61L27/20;A61L27/54;A61L27/56
• 代理公司: 廣州市天河廬陽專利事務所(普通合伙)44244
• 代理人: 胡濟元

1.一種載有普伐他汀鈉的血管組織工程支架材料的制備方法，該方法由以下步驟組成：

(1)將殼聚糖溶于體積濃度為1～3％的醋酸溶液中，磁力攪拌1～24h，使其充分溶解，靜置，配成質量濃度為0.5～3％的殼聚糖溶液；將明膠溶于40℃水中，配成質量濃度為0.5～5％的明膠溶液；

(2)將京尼平溶解在體積濃度為10～60％的乙醇中，制成濃度為0.2～1.2g/L的交聯劑溶液，或者將EDC/NHS溶解在MES-乙醇中，制成濃度為12.5～22.5g/L的交聯劑溶液；其中，所述的EDC/NHS由EDC與NHS按EDC︰NHS＝2︰1的質量比混合制成，所述的MES-乙醇由MES與體積濃度為40％的乙醇混合制成，且MES在體積濃度為40％的乙醇中的濃度為50mmol/L；

(3)將步驟(1)制得的明膠溶液和殼聚糖溶液按明膠溶液︰殼聚糖溶液＝1︰1～5︰1的體積比混合，攪拌0.5～12h，靜置，除去氣泡，得到混合溶液；然后，先按混合溶液︰交聯劑溶液＝5︰1～5的體積比往混合溶液中加入步驟(2)制得的交聯劑溶液，再加入包載普伐他汀鈉的殼聚糖微球，控制殼聚糖微球的終濃度為10～50％的質量濃度；磁力攪拌均勻倒入血管支架模具中，室溫下放置6～48h，轉移至-10～-60℃下預處理2～48h后轉入冷凍干燥機中，冷凍干燥后脫模；

(4)將脫模后的血管支架放入稀NaOH溶液中浸泡0.5-12h后放入蒸餾水中反復洗滌，于-10～-60℃下預處理2～48h后轉入冷凍干燥機中，冷凍干燥即得血管組織工程支架材料；

上述步驟(3)中所述的包載普伐他汀鈉的殼聚糖微球由以下方法制得：

(A)將乳化劑與機溶劑按乳化劑︰有機溶劑＝2︰100～8︰100體積比混合，攪拌均勻，制得油相；其中，所述的乳化劑為span-80、吐溫-80、卡波姆1342或單油酸二甘酯，所述的有機溶劑為液體石蠟、大豆色拉油、橄欖油或苯甲酸乙酯；

(B)水相制備：將殼聚糖加入到體積濃度為0.5～3％的醋酸溶液中，磁力攪拌1～24h，使其充分溶解，靜置，配成質量濃度為0.5～3％的殼聚糖溶液；將普伐他汀鈉溶解于水中，使得普伐他汀鈉在水中的濃度13.3～66.6g/L，得到普伐他汀鈉水溶液；然后，將殼聚糖溶液與普伐他汀鈉水溶液混合均勻，制得含有質量比為普伐他汀鈉︰殼聚糖＝1︰1～1︰5的水相；

(C)將交聯劑京尼平溶于體積濃度為30～90％的乙醇中，配成京尼平在30～90％的乙醇中濃度為1.3～13g/L的交聯劑溶液；

(D)按油相︰水相＝2︰1～15︰1的體積比將步驟(B)制得的水相邊攪拌邊滴加到步驟(A)制得的油相中，再繼續攪拌0.5～6h，制得w/o型乳液；

(E)4～60℃下，按京尼平在w/o型乳液中濃度為0.085～0.85g/L將步驟(C)制得的交聯劑溶液在攪拌的條件下分2～3次等量滴加到步驟(D)制得的w/o型乳液中，加完后繼續攪拌2～48h，其中，分2次或3次滴加的間隔為10～60min，每次滴加的時間為10～30min；然后，高速離心，棄去上層液，將下層的固體用石油醚、丙酮、異丙醇、氯仿和乙醇中的兩種或三種各洗滌3次；最后，將所得產物真空干燥，即得包載普伐他汀鈉的殼聚糖微球。