[發明專利]一種促進重組極端耐熱α-淀粉酶可溶性表達的方法有效
| 申請號： | 201510257537.0 | 申請日： | 2015-05-19 |
| 公開（公告）號： | CN105087520B | 公開（公告）日： | 2018-07-20 |
| 發明（設計）人： | 張毅;彭帥英;楊勝利 | 申請（專利權）人： | 中國科學院上海生命科學研究院 |
| 主分類號： | C12N9/26 | 分類號： | C12N9/26;C12N15/70 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人： | 陳靜 |
| 地址： | 200031 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 促進 重組 極端 耐熱 淀粉酶 可溶性 表達 方法 | ||
1.一種重組表達極端耐熱α-淀粉酶的方法，其特征在于，所述方法包括：將極端耐熱α-淀粉酶的編碼基因與分子伴侶蛋白Prefoldin的編碼基因共同表達，獲得可溶性的極端耐熱α-淀粉酶；其中，所述的極端耐熱α-淀粉酶是極端耐熱α-淀粉酶PFA。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的極端耐熱α-淀粉酶的編碼基因與分子伴侶蛋白Prefoldin的編碼基因在大腸桿菌細胞中共同表達。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的共同表達的方法包括：
(1)提供表達載體，所述的表達載體含有極端耐熱α-淀粉酶的表達盒和分子伴侶蛋白Prefoldin的表達盒；
(2)將(1)的表達載體轉化大腸桿菌細胞，培養轉化有所述表達載體的重組大腸桿菌細胞，獲得可溶性的極端耐熱α-淀粉酶。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的含有極端耐熱α-淀粉酶的表達盒和分子伴侶蛋白Prefoldin的表達盒分別位于不同的表達載體中。
5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的含有極端耐熱α-淀粉酶的表達盒和分子伴侶蛋白Prefoldin的表達盒位于同一表達載體中。
6.分子伴侶蛋白Prefoldin的用途，用于與重組極端耐熱α-淀粉酶共同表達，促進重組極端耐熱α-淀粉酶可溶性表達。
7.重組的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞中含有極端耐熱α-淀粉酶的表達盒和分子伴侶蛋白Prefoldin的表達盒；其中，所述的極端耐熱α-淀粉酶是極端耐熱α-淀粉酶PFA。
8.一種重組表達極端耐熱α-淀粉酶的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包括：
表達載體，所述的表達載體含有極端耐熱α-淀粉酶的表達盒和分子伴侶蛋白Prefoldin的表達盒；其中，所述的極端耐熱α-淀粉酶是極端耐熱α-淀粉酶PFA。
9.如權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述的表達載體包括：pT7473，pACYC或pCDF。
10.如權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中還包括：大腸桿菌細胞。
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