[發明專利]一種利用酵母細胞壁聯產葡聚糖、甘露糖蛋白的方法

有效

• 申請號: 201510244518.4
• 申請日: 2015-05-13
• 公開（公告）號: CN104862355B
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 陳遠才;陳雪松;熊明洲;張敬松;周志剛
• 申請（專利權）人: 珠海天香苑生物科技發展股份有限公司
• 主分類號: C12P19/08
• 分類號: C12P19/08;C12P21/06
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙)11411
• 代理人: 曾少麗

技術領域

本發明屬于生物化學領域，具體涉及一種利用酵母細胞壁聯產葡聚糖、甘露糖蛋白的方法。

背景技術

我國酵母資源非常豐富，酵母深加工產業也比較發達，每年酵母抽提物產量大約6萬噸，因而伴隨這大量的酵母細胞壁產生。酵母細胞壁一般用做飼料產品，產品附加值不高。

酵母β-葡聚糖具有獨特的三股螺旋結構，其螺旋外側有一些親水基團，能與機體的免疫細胞受體特異性結合，刺激其處于高度活性狀態，其能刺激體液免疫和細胞免疫，具有非特異性免疫機制和造血功能，可起到抗腫瘤、清除游離基抗氧化、抗輻射、清腸、降低血清中膽固醇水平、預防心血管疾病等作用。

甘露糖蛋白作為一種葡萄酒穩定劑，廣泛的應用于葡萄酒的生產中。有利于葡萄酒的蛋白和酒石穩定，能夠減弱葡萄酒中單寧的收斂性和尖刻感，提高酒的飽滿肥碩感。

雖然，目前有以酵母細胞壁為原料，用來生產酵母葡聚糖、甘露糖蛋白(彼得·菲利普CN101087872B、俞學鋒CN102051400B、田中美和CN101018852A)，但這些方法都是單獨提取葡聚糖或甘露糖蛋白，這些方法的特點大多是破壞性的方法去掉另一種組分而得到單一的產品，不僅浪費原料，而且不利于環境的保護。雖然也有少數專利可以一次性提取兩種或三種酵母細胞壁中的活性物質(俞學鋒CN101570769A、陳曉春等CN102329380B)，但這些方法用到了強堿(氫氧化鈉或氫氧化鉀)、有機溶劑(正丁醇、氯仿等)，而葡聚糖、甘露糖蛋白主要應用到食品中，這些有機溶劑給產品帶來了一定安全性隱患，同時增加了生產時的安全限制(生產設備需嚴格通風、增加防爆措施)，大量使用的堿液增大了環保壓力。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中的不足，提供一種利用酵母細胞壁聯產葡聚糖、甘露糖蛋白的方法。

本發明是這樣實現的：

一種利用酵母細胞壁聯產葡聚糖、甘露糖蛋白的方法，包括以下步驟：

1)取酵母細胞壁，加水定容至5-10％質量體積比；

2)10-100Mpa高壓均質噴射處理2-8次；

3)調節pH至9.0-11.0，采用蒸汽連消的方法，將酵母細胞壁溶液通過蒸汽噴射器，蒸汽列管維持120-135℃，連消60-120s；

4)降溫至50-55℃，加入堿性蛋白酶，保溫維持12-18h，堿性蛋白酶的加入量為酵母細胞壁重量的1-3％；

5)離心分離，離心重液加入水洗滌，干燥即得葡聚糖；離心輕液通過耐堿納濾膜過濾，截留液濃縮、干燥即得甘露糖蛋白。

進一步地，步驟5)中，耐堿納濾膜的截留分子量為50-500Da，例如100Da、200Da等。

進一步地，步驟5)中，離心輕液通過耐堿納濾膜過濾后，繼續加水洗滌、過濾。

進一步地，步驟5)中，截留液在濃縮干燥前，通過超濾膜過濾，過濾液再濃縮至濃度達20Be°以上，噴霧干燥得到甘露糖蛋白。

進一步地，所述超濾膜的截留分子量為10000-30000da。

本發明具有以下有益效果：

1、以低附加值酵母細胞壁作為原料生產的葡聚糖可以用于食品中，對糖尿病人、肥胖癥、便秘和高膽固醇等疾病患者有良好的輔助治療作用；

2、一次提取葡聚糖和甘露糖蛋白，縮短生產時間，且葡聚糖和甘露糖蛋白產率高，每100kg酵母細胞壁可生產得到葡聚糖16kg以上以及甘露糖蛋白16kg以上；

3、生產過程中不使用有機溶劑，產品安全性較高；

4、生產過程中不使用強堿處理，減少了污染物的排放，對環境保護具有重要意義。

具體實施方式

下面結合具體的實施例對本發明作進一步的描述，以更好地理解本發明。

實施例1

取酵母細胞壁100kg，加水定容至5％質量體積比；60Mpa高壓均質噴射處理6次；調節pH至9.0-11.0，采用蒸汽連消的方法，將細胞壁溶液通過蒸汽噴射器，蒸汽列管維持120-135℃，連消60s；降溫至50℃，加入3％堿性蛋白酶(以酵母細胞壁計)，保溫維持18h。

離心分離。離心重液加入等體積水洗滌，反復8次，噴霧干燥即得葡聚糖20.0kg。離心輕液通過耐堿納濾膜(截留分子量200Da)過濾。繼續加入6倍體積水洗滌、過濾。截留液繼續使用分子量為10000-30000Da的超濾膜過濾，超濾膜透過液濃縮至濃度達20Be°以上時，噴霧干燥即得甘露糖蛋白產品20.0kg。

實施例2