[發明專利]采用特異性引物鑒別汾遠2號遠志的方法有效
| 申請號： | 201510244426.6 | 申請日： | 2015-05-13 |
| 公開（公告）號： | CN104818337B | 公開（公告）日： | 2017-06-20 |
| 發明（設計）人： | 張福生;王丹丹;許曉雙;秦雪梅;張麗增 | 申請（專利權）人： | 山西大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 山西五維專利事務所(有限公司)14105 | 代理人： | 張福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 國省代碼： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 采用 特異性 引物 鑒別 遠志 方法 | ||
1.一種采用特異性引物鑒別汾遠2號遠志的方法，其特征在于，由以下步驟完成：
1)提取遠志樣品中的DNA；
2)以步驟1)中提取的DNA為模板，使用特異性引物進行PCR擴增反應；
3)用瓊脂糖凝膠電泳分析PCR產物，有PCR擴增條帶者即為汾遠2號遠志，無PCR擴增條帶者則非汾遠2號遠志；
所述的特異性引物是如下(1)至(8)引物對中的任意一對：
(1)上游引物F1：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R1：5＇TCGCCCCAAGAGATGTGA 3＇
(2)上游引物F2：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R2：5＇TCGCCCCAAGAGATCAGA 3＇
(3)上游引物F3：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R3：5＇TCGCCCCAAGAGATGTGA 3＇
(4)上游引物F4：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R4：5＇TCGCCCCAAGAGATCAGA 3＇
(5)上游引物F5：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R5：5＇ACCAAGTATCGCATTTCGC 3＇
(6)上游引物F6：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R6：5＇ACCAAGTATCGCATTTCGC 3＇
(7)上游引物F7：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R7：5＇TCGCCCCAAGAGATGAGA 3＇
(8)上游引物F8：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R8：5＇TCGCCCCAAGAGATGAGA 3＇
所述PCR擴增反應體系為：
所述第(1)至第(4)對引物對的PCR反應條件為：93℃5min；93℃30s，60℃30s，72℃30s，共35個循環；72℃5min，10℃10min；第(5)至第(8)對引物對的PCR反應條件為：93℃5min；93℃30s，65℃30s，72℃30s，共30個循環；72℃5min，10℃10min。
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