[發明專利]采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法有效
| 申請號: | 201510243114.3 | 申請日: | 2015-05-12 |
| 公開(公告)號: | CN104880519B | 公開(公告)日: | 2016-11-23 |
| 發明(設計)人: | 陳學松;賴秀梅;溫志芳;陳啟釗;郭振旺;吳嵐 | 申請(專利權)人: | 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所 |
| 主分類號: | G01N30/06 | 分類號: | G01N30/06 |
| 代理公司: | 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295 | 代理人: | 黃為;蔡國 |
| 地址: | 543000 廣西壯*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 采用 sle 分離 中的 多巴胺 方法 | ||
1.一種采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:樣品預處理;收集豬尿,首先加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進行酶解,每毫升的尿液中加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶12μL,酶解結束后加入三氯乙酸沉淀豬尿中的蛋白質,加入4倍豬尿體積的Ph范圍為8.0~10.0的氨水-氯化銨緩沖液,漩渦混合器混合后離心;取離心后的上清液;
步驟2:將上清液加入到SLE柱后,靜置2~4分鐘;
步驟3:采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次,接收洗脫液,得到含有萊克多巴胺的洗脫液;
其中,所述的二元洗脫劑為異丙醇和二氧六環的混合物,其中異丙醇和二氧六環的重量比為0.8~1:1。
2.根據權利要求1所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,所述的豬尿為1ml,緩沖溶液為4ml,步驟2中所取的上清液為0.5ml。
3.根據權利要求2所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,,所述的步驟3中,每次洗脫時所用的洗脫劑為0.5ml。
4.根據權利要求2所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,所述的三氯乙酸和豬尿的質量比為1:98~100。
5.根據權利要求1所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,所述的步驟1中,漩渦混合器混合處理的時間為0.5~1.5分鐘。
6.根據權利要求5所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,所述的步驟1中,所述的離心處理的具體操作為:將經混合處理的溶液在離心機中以9000~11000轉/分鐘的速度離心0.5~1.5分鐘。
7.根據權利要求1至6任一所述的采用SLE法分離豬尿中的萊克多巴胺的方法,其特征在于,所述的SLE柱為奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱。
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