[發明專利]一種建立乙醇、HBV雙因素所致肝癌癌前病變小鼠模型的方法

有效

• 申請號: 201510232486.6
• 申請日: 2015-05-08
• 公開（公告）號: CN104904660B
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發明（設計）人: 唐東昕;楊柱;郭斌
• 申請（專利權）人: 貴陽中醫學院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61K31/045
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙)11362
• 代理人: 張梅

1.一種建立乙醇、HBV雙因素所致肝癌癌前病變小鼠模型的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）動物：1.3拷貝高復制HBV轉基因小鼠；

2）試劑：白酒；

3）肝癌癌前病變小鼠模型的制備：HBV轉基因小鼠每天給予白酒，連續灌胃22周，期間小鼠自由進食、飲水；

4)肝癌癌前病變模型小鼠后期處理：灌胃結束后，分別稱重，取小鼠處死，取肝組織,稱肝重，計算肝臟指數，并進行病理切片觀察;

所述步驟1）中，1.3拷貝高復制HBV轉基因小鼠為6-8周齡，體重23±2g，雄性;

所述步驟3）中，HBV轉基因小鼠灌胃白酒前，先適應性飼養一周以上;

所述步驟3）中，白酒酒精度為53%vol，劑量為10ml·kg^-1，次數為每天一次;

所述步驟3）中，小鼠在灌胃白酒的過程中，需5天稱一次體重，并根據體重變化調整灌胃劑量;

所述步驟4）中的具體操作方法為：灌胃結束后，分別稱重，將小鼠摘除眼球取血，頸椎脫臼處死小鼠,處死后的小鼠立即取出肝臟，鹽水沖洗后，吸干水分稱重，計算小鼠肝臟指數,然后放入已準備好的4%多聚甲醛固定液瓶中固定、脫水、包埋、切片、HE染色，在400倍光鏡下觀察肝組織病理情況。