[發明專利]脂肪原始間充質干細胞的分離方法有效
| 申請號： | 201510219301.8 | 申請日： | 2015-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN104805055B | 公開（公告）日： | 2020-02-21 |
| 發明（設計）人： | 吳炯 | 申請（專利權）人： | 廈門中領精準醫學產業發展有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400 | 代理人： | 高之波;鄔玥 |
| 地址： | 361000 福建省廈門*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 脂肪 原始 間充質 干細胞 分離 方法 | ||
【權利要求書】：
1.脂肪原始間充質干細胞的分離方法，其特征在于，采用P型膠原酶消化脂肪組織，包括以下步驟：
配制P型膠原酶母液：100ml生理鹽水加入1g P型膠原酶；消化脂肪組織：向獲取的腹部淺表層的脂肪組織中加入等體積的0.4％(m/v)的P型膠原酶充分混勻，37℃150rpm震蕩消化16min；
離心收集：消化產物經過過濾及梯度離心后，取離心得到的沉淀即脂肪間充質干細胞，所述獲取的腹部淺表層的脂肪組織維持在2～8℃的環境中運輸，12小時內進行分離操作。
2.根據權利要求1所述的脂肪原始間充質干細胞的分離方法，其特征在于，所述離心收集的方法為：消化產物經150目篩網過濾，收集細胞初懸液，將細胞初懸液經1500rpm、10min，1200rpm、10min，1000rpm、10min三次梯度離心后，取離心得到的沉淀即脂肪間充質干細胞。
3.根據權利要求1所述的脂肪原始間充質干細胞的分離方法，其特征在于，所述獲取的腹部淺表層的脂肪組織在消化前采用生理鹽水洗滌。
4.根據權利要求3所述的脂肪原始間充質干細胞的分離方法，其特征在于，所述洗滌的方法為：將脂肪組織放入離心管內，20ml/管，補加生理鹽水至40ml，離心200rpm，3min，棄下層血水，重復上述步驟。
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