[發明專利]一種暗紫貝母組織培養方法

無效

• 申請號: 201510216173.1
• 申請日: 2015-05-02
• 公開（公告）號: CN104782488A
• 公開（公告）日: 2015-07-22
• 發明（設計）人: 馮文杰
• 申請（專利權）人: 馮文杰
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 盧翔飛

1.一種暗紫貝母組織培養方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）外植體消毒：以暗紫貝母鱗莖為外植體，先75%乙醇浸泡15～30s，

無菌水沖洗3～5次，再用10%～20%次氯酸鈉溶液浸泡20～30min，無菌水沖洗3～5次后備用；

????（2）誘導培養：將步驟（1）處理好的暗紫貝母鱗莖切成0.5cm左右的切塊并接種于誘導培養基中進行不定芽誘導，接種后置于每天光照12～14小時，光照強度為1000～2000lx，置于培養溫度為25～28℃，空氣相對濕度為75%的條件下培養30天后統計誘導率；

（3）增殖培養：以步驟（2）誘導得到不定芽作為材料，將老化的和生長不良的不定芽去掉，并將生長狀態良好的不定芽切成單芽并轉入增殖培養基進行擴繁，接種后置于每天光照12～14小時，光照強度為2000～3000lx，置于培養溫度為25～28℃，空氣相對濕度為75%的條件下培養30天后統計增殖情況；

（4）生根培養：將經步驟（3）后得到的生長較一致且健壯的未生根的無菌苗單株切下轉入生根培養基誘導，接種后置于每天光照12～14小時，光照強度為2000～3000lx，置于培養溫度為25～28℃，空氣相對濕度為75%的條件下培養30天后統計生根情況；

（5）煉苗移栽：將生根的無菌苗從培養室中取出放在室外煉苗?30?天后，再將生根苗從瓶中取出洗去基部的培養基，然后移栽到經過高溫滅菌的基質（泥炭土:珍珠巖:蛭石＝3:1:1）中，定期澆澆1/2MS大量元素營養液，覆蓋薄膜，10天后揭膜，揭膜后?20?天統計成活率。

2.????根據權利要求1所述的一種暗紫貝母組織培養方法，其特征在于步驟（2）所述的誘導培養基為：MS+1.0～5.0mg/L?NAA+0.1～1.0mg/L?6-BA+0.5～1mg/L?AC+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

3.根據權利要求1所述的一種暗紫貝母組織培養方法，其特征在于步驟（3）所述的增殖培養基為：MS+0.1～1.0mg/L?6－BA+0.1～1.0mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

4.????根據權利要求1所述的一種暗紫貝母組織培養方法，其特征在于步驟（4）所述的生根培養基為：1/2MS+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。