[發(fā)明專利]一種葉酸修飾的磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510211769.2
• 申請(qǐng)日: 2015-04-29
• 公開（公告）號(hào): CN104784153B
• 公開（公告）日: 2019-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉芬菊;華松;俞家華;華道本;周媛;張昊文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/51
• 分類號(hào): A61K9/51;A61K47/36;A61K47/20;A61P35/00
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 陶海鋒

本發(fā)明公開了一種葉酸修飾的磺酸甜菜堿?殼聚糖納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用。具體而言，本發(fā)明的納米顆粒通過包括如下步驟的方法制得：1）包含葉酸、脫水縮合劑和縮合促進(jìn)劑的混合溶液的制備；2）葉酸在磺酸甜菜堿?殼聚糖上的接枝；以及3）納米顆粒的透析和凍干。本發(fā)明提供的葉酸修飾的磺酸甜菜堿?殼聚糖納米顆粒具有良好的生物相容性和生物可降解性以及較強(qiáng)的抗蛋白吸附性能。另外，由于葉酸接枝的引入，本發(fā)明的磺酸甜菜堿?殼聚糖納米顆?？梢允蛊渲邪幕熕幬锇邢蛴谌~酸受體高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，提高了治療效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于具有腫瘤靶向作用的納米顆粒制劑領(lǐng)域，具體涉及一種葉酸修飾的磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

化學(xué)治療（chemotherapy）作為癌癥治療的重要手段之一，長(zhǎng)期以來一直受到高度關(guān)注。從1946年氮芥的臨床應(yīng)用至今，腫瘤的化療應(yīng)用得到了近70年的發(fā)展。然而，到目前為止，僅有少部分惡性腫瘤如惡性淋巴瘤、絨毛膜上皮癌等有可能通過化療得到治愈，90%以上的惡性腫瘤仍未能達(dá)到滿意的療效。許多抗腫瘤藥物所存在的臨床療效低下、特異性差、毒副作用大等問題已經(jīng)成為癌癥化療中的瓶頸。由于無法控制抗腫瘤藥物集中于腫瘤部位，病人的正常組織和器官通常會(huì)受到不必要的傷害，甚至威脅到患者的生命。

近年來，利用納米載體負(fù)載抗腫瘤藥物的方法，不僅可以提高藥物溶解度、增加藥物穩(wěn)定性以及實(shí)現(xiàn)藥物緩釋，還能夠借助其特殊的尺寸范圍和表面性質(zhì)大幅度地改變藥物在體內(nèi)的分布和代謝狀況，增強(qiáng)藥物對(duì)腫瘤血管壁的滲透并在腫瘤部位富集（EPR效應(yīng)），延長(zhǎng)藥物在腫瘤部位的作用時(shí)間。此外，經(jīng)靶向分子修飾的納米顆?？梢酝ㄟ^主動(dòng)靶向提高腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，實(shí)現(xiàn)藥物特異性輸送到腫瘤部位，在提高治療效果的同時(shí)減輕對(duì)其他臟器的傷害，已成為研究的熱點(diǎn)與重點(diǎn)。

葉酸（Folic Acid，F(xiàn)A）是一種小分子水溶性維生素，腫瘤細(xì)胞會(huì)通過主動(dòng)運(yùn)輸來攝取微環(huán)境中的葉酸，以便維持過度活躍的新陳代謝作用，因此在大部分腫瘤細(xì)胞表面均存在過量表達(dá)的葉酸受體，而正常細(xì)胞表面上的葉酸受體表達(dá)量很少。研究表明，將葉酸分子連接在納米載體表面，可以提高葉酸受體高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞對(duì)納米載藥體系的吞噬，實(shí)現(xiàn)納米載體所負(fù)載的抗腫瘤藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向輸送。

通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)可以發(fā)現(xiàn)，雖然目前已有多項(xiàng)專利公開了以葉酸為靶向分子的靶向納米藥物載體，但是合成葉酸修飾的磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒作為藥物載體用于抗腫瘤藥物輸送與腫瘤靶向治療的研究尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述情況，本發(fā)明的目的在于提供一種葉酸修飾的磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明利用某些腫瘤細(xì)胞表面葉酸受體高表達(dá)這一特點(diǎn)，將其配體葉酸嫁接在磺酸甜菜堿-殼聚糖上面，合成出一種兩親性納米顆粒。在水溶液中，上述兩親性納米顆?？梢园恍┦杷孕》肿踊熕幬锶缱仙即?、依托泊苷、他莫昔芬等。相對(duì)于單純的化療藥物，本發(fā)明的載藥納米顆粒具有良好的藥物緩釋效果以及較高的藥物溶解度和穩(wěn)定性，可以在血液里發(fā)揮長(zhǎng)循環(huán)作用，而且對(duì)高葉酸受體表達(dá)的腫瘤細(xì)胞具有靶向性和明顯的抑制效果，可用于癌細(xì)胞的靶向治療。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種葉酸修飾的磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒的制備方法。首先，在大劑量γ射線的照射下，通過自由基間的聚合反應(yīng)把一個(gè)含有兩性離子的小分子親水性化合物——磺酸甜菜堿（SBMA）嫁接在殼聚糖表面，這樣就會(huì)形成一個(gè)兩親性的納米顆粒；然后，在脫水縮合劑（EDC、DCC或DIC）和縮合促進(jìn)劑（NHS、DMAP或HoBt）的參與下，采用酰胺化反應(yīng)把葉酸（FA）接枝到磺酸甜菜堿-殼聚糖（Cs-g-PSBMA）骨架上，最終得到用于負(fù)載活性藥物的葉酸-磺酸甜菜堿-殼聚糖納米顆粒（Cs-g-PSBMA-FA），其結(jié)構(gòu)如圖1所示。

具體而言，該制備方法包括如下步驟：