[發明專利]一種瑪咖多倍體植株的培育方法

有效

• 申請號: 201510156556.4
• 申請日: 2015-04-03
• 公開（公告）號: CN104686370B
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 王樞
• 申請（專利權）人: 會澤樞康中草藥種植有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司53114
• 代理人: 馬汝蘭

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種藥食兩用植物新品種的選育方法，具體涉及一種瑪咖多倍體植株的培育方法。

背景技術

瑪咖Lepidiummeyenii為十字花科（Brassicaceae）獨行菜屬（Lepidium）一年生草本植物，原產于秘魯海拔 3500 m 以上的安第斯山區，可在無肥料、缺氧、晝夜溫差大、長期冰封的獨特環境下正常生長。瑪咖在營養成分和增強精力、耐力的功效方面可以與人參媲美，因此又常被稱為“Peruvian Ginseng（秘魯人參）”。由于瑪咖在生長中吸取了大量的土壤養分，原始耕作情況下，瑪咖根采收后的土地需要休耕數年才能再次種植，因此瑪咖一度曾瀕臨絕種，被國際上列為瀕危植物。直到 1982 年，在聯合國糧農組織（FAO）和國際植物遺傳資源研究所（IPGRI）等國際組織的努力下，這種珍貴的植物才得以逐步推廣，嘉惠世人。此后，FAO 等國際組織又先后多次向各國推薦種植和食用瑪咖，并指出瑪咖是一種營養豐富的安全食物，可以解決多種因營養不足引起的健康問題。瑪咖自2002年引進中國以來，十分適宜在我國西部高寒地區生長，現已在云南會澤，新疆，西藏等地成功種植，并開始了產品加工，具有很好的市場前景，同時對改善西部生態環境、發展當地經濟也將起到積極的推動作用。瑪咖在中國的種植現主要集中在云南（占全國的98%），新疆（占全國的1%），西藏（占全國的0.5%），四川（占全國的0.5%），種植海拔在2500米以上。云南現有的種植規模已有10000畝左右，年產瑪咖干果干片原料250噸，目前已基本滿足初級市場的需求量。但隨著市場的擴大，參照國外市場看，最終將會形成以瑪咖食品、保健品、藥品、食品添加劑、藥品添加劑等形態的瑪咖產業鏈，瑪咖原料的需求量將會出現井噴現象。對此，云南省政府已經出臺了“加快瑪咖產業發展的若干意見”，將瑪咖產業列為十二五重點發展的農業及生物產業對象，提出5年內建設5萬畝的目標，至十二五結束達到15—20萬畝的目標。

植物多倍體的典型遺傳特征是營養器官的巨大性，特別是對地下變態營養器官如塊根類植物具有特殊的增產效果，在以此類營養器官入食、入藥的植物上具有重要的育種價值；同時植物多倍體提高了主要化學成分含量，可大幅度提高栽培植物的品質。這些對于以塊根為入食、入藥的瑪咖來說，更是意義重大。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，針對現有瑪咖品質及產量較低的問題，提供一種瑪咖多倍體植株的培育方法，選育出一批多倍體瑪咖新種質，為瑪咖多倍體育種奠定技術基礎，同時亦可提供基因型背景一致的多倍體種苗以滿足人工種植的需求。

為了解決以上所述技術問題，本發明所述瑪咖多倍體植株的培育方法包括以下步驟：

（1）以B₅為基本培養基，附加蔗糖20000mg/L和瓊脂粉4800mg/L，調整pH值為5.4-5.8，制得培養基A；用細紗布將瑪咖種子按100粒/包，包好放到流水下沖洗2 h后，置于超凈工作臺上，用體積比75％的酒精浸泡60 s，再用質量比0.1％HgCl₂滅菌8 min，最后用無菌水沖洗10次，每次不低于2 min，之后放在無菌濾紙上，打開細紗布吸干表面水分，得到消毒滅菌處理的種子，將所述消毒滅菌后的瑪咖種子接種于所述基培養基A中，在光照度1500-2000 lx，光照時間10 h/d，溫度控制在20±1℃的條件下，進行種子萌發；

（2）以B₅為基本培養基，附加萘乙酸NAA1.5-2.0 mg/L、玉米素ZT0.1-1.0 mg/L、秋水仙素0.5-2.0 mg/L、蔗糖20000mg/L和瓊脂粉4800mg/L，調整pH值為5.4-5.8，制得愈傷組織誘導培養基B；所述步驟（1）中種子培養5-7d，幼苗子葉完全展開，將下胚軸切為0.5-1.0 cm大小，轉接至所述愈傷組織誘導培養基B中，在光照度1500-2000 lx，光照時間10 h/d，溫度控制在20±1℃的條件下，培養5d后有愈傷組織出現，20d后愈傷組織生長迅速，質地緊密，表被白色絨毛；