[發(fā)明專利]一種促進杏黃兜蘭無菌苗生長及增殖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510147487.0
• 申請日: 2015-03-31
• 公開（公告）號: CN104719166A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 嚴寧;牟宗敏;胡虹
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明協(xié)立知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53108
• 代理人: 馬曉青

1.一種促進杏黃兜蘭無菌苗生長及增殖的方法，其特征在于在基本培養(yǎng)基中加入不同濃度或不同比例的KNO₃或NH₄NO₃，進行影響無菌苗生長的試驗，通過調(diào)節(jié)不同階段培養(yǎng)基中的氮源類型、濃度和比例，促進杏黃兜蘭無菌苗增殖、生長及生根。

2.一種促進杏黃兜蘭無菌苗生長及增殖的方法，其特征在于所述的調(diào)節(jié)氮源類型和濃度是指用KNO₃∶NH₄NO₃比例為1∶1，總濃度為60mML^-1，也就是用KNO₃和NH₄NO₃濃度各為30mML^-1的1/2MS培養(yǎng)基促進杏黃兜蘭無菌苗增殖；用KNO₃為氮源，濃度為40mML^-1的1/2MS培養(yǎng)基促進生長較多葉片和較大葉面積；用濃度為0或10mML^-1的KNO₃為氮源的1/2MS培養(yǎng)基促進生根。

3.一種促進杏黃兜蘭無菌苗生長及增殖的方法，其特征在于所述的基本培養(yǎng)基為1/2MS無氮培養(yǎng)基，包括下述部分：CaCl₂·2H₂O?220mg/L,MgSO₄·7H₂O?185mg/L,KH₂PO₄?85mg/L,KI?0.83mg/L,H₃BO₃?6.20mg/L,MnSO₄·4H₂O?22.30mg/L,ZnSO₄·7H₂O?8.60mg/L,Na₂MoO₄·4H₂O?0.25mg/L,CuSO₄·5H₂O?0.025mg/L,CoCl₂·6H₂O?0.025mg/L,FeSO₄·7H₂O?27.80mg/L,Na-EDTA·2H₂O?37.30mg/L,肌醇100mg/L,煙酸0.5mg/L,鹽酸吡哆醇0.5mg/L,鹽酸硫胺素0.5mg/L,甘氨酸2.0mg/L；添加0.3g?L^–1活性碳，20g?L^–1蔗糖，8g?L^–1瓊脂，0.25mg?L^–16-BA。100ml培養(yǎng)基/瓶；光照培養(yǎng)室條件采用日光燈為光源，光照強度為40μmol?m^–2s^–1，光周期為12小時，日溫和夜溫分別為25和18℃。

4.一種促進杏黃兜蘭無菌苗生長及增殖的方法，其特征在于所述的在基本培養(yǎng)基中加入不同濃度或不同比例的KNO₃或NH₄NO₃，進行影響無菌苗生長的試驗包括如下步驟：

(1)以KNO₃為氮源，設(shè)置4個氮濃度：10、20、40、60mM?L^–1的培養(yǎng)基，以1M?L^–1的氯化鉀調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中鉀離子濃度；

(2)以NH₄Cl為氮源，設(shè)置4個氮濃度：10、20、40、60mM?L^–1的培養(yǎng)基，以1M?L^–1的氯化鉀調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中鉀離子濃度；

(3)以KNO₃+NH₄NO₃為氮源，二者比例為1:1，與MS培養(yǎng)基中比例相同，設(shè)置4個氮濃度：10、20、40、60mM?L^–1的培養(yǎng)基；

以不含氮0mM?L^–1的基本培養(yǎng)基為對照，將幼苗分別轉(zhuǎn)至以上三個步驟中所述的12種培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)室中培養(yǎng)，光照培養(yǎng)室條件采用日光燈為光源，光照強度為40μmol?m^–2s^–1，光周期為12小時，日溫和夜溫分別為25和18℃。