[發明專利]一種利用木質纖維素水解液生產益生菌的方法有效
| 申請號: | 201510143231.2 | 申請日: | 2015-03-30 |
| 公開(公告)號: | CN104762250B | 公開(公告)日: | 2018-07-10 |
| 發明(設計)人: | 尹亮;陳枚曉;曾天歡 | 申請(專利權)人: | 華南師范大學 |
| 主分類號: | C12N3/00 | 分類號: | C12N3/00;C12N1/22;C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 陳衛 |
| 地址: | 510631 廣東省廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 凝結芽孢桿菌 芽孢 木質纖維素水解液 芽孢形成 益生菌 木質纖維素原料 發酵培養基 農林生物質 比例添加 高溫水解 生產水平 脫毒處理 木質素 水解液 生產工藝 農林 生產 應用 | ||
1.木質纖維素水解液在提高凝結芽孢桿菌的芽孢濃度方面的應用,其特征在于,所述木質纖維素水解液是由農林生物質原料經過1~4%的硫酸105~130℃水解處理1~2 h后,真空抽濾,濾液再經Ca(OH)2脫毒處理獲得,所述農林生物質原料是水稻秸稈、米糠、甘蔗渣、花生殼、核桃殼或麩皮中一種或幾種。
2.根據權利要求1所述應用,其特征在于,所述應用的方法是凝結芽孢桿菌以木質纖維素水解液為碳源進行發酵。
3.根據權利要求1所述應用,其特征在于,所述農林生物質原料是水稻秸稈。
4.使用權利要求1所述木質纖維素水解液提高凝結芽孢桿菌芽孢濃度的方法,其特征在于,步驟如下:
S1.利用農林生物質原料制備木質纖維素水解液;
S11.將農林生物質原料粉碎至粉狀,按固液比10g:100mL的比例,將粉碎后的農林生物質原料與2%的硫酸混合,在121℃下反應1.5 h后真空抽濾,得濾液;其中,所述農林生物質原料是水稻秸稈、米糠、甘蔗渣、花生殼、核桃殼或麩皮中一種或幾種;
S12.向S11得到的濾液中加入Ca(OH)2,調節溶液pH至9.0~10.0,沉降1h后抽濾抽取濾液;
S13.用2M H2SO4將S12得到濾液的pH調至6.0,靜置1h后抽濾抽取濾液;
S2.將木質纖維素水解液加入到凝結芽孢桿菌發酵培養液中,接種凝結芽孢桿菌進行發酵;木質纖維素水解液的用量占加入木質纖維素水解液后發酵培養液總量的10~50v/v%;
步驟S2所述發酵培養液不含其它碳源,僅以木質纖維素水解液作為碳源。
5.根據權利要求4所述方法,其特征在于,步驟S1所述農林生物質原料是水稻秸稈。
6.根據權利要求4所述方法,其特征在于,步驟S2所述發酵培養液的配方為:磷酸氫二鉀2 g/L,磷酸二氫鉀1.0 g/L,硫酸鎂2 g/L,三氯化鐵0.28 g/L,硫酸銨0.6 g/L,酵母膏0.8 g/L,pH7.0~7.4;
步驟S2所述接種凝結芽孢桿菌進行發酵的具體步驟為:
S21.種子液培養:將斜面菌種挑入到滅菌的種子培養基中,30℃、150rpm振蕩培養24h,發酵液即為種子液;所述種子培養基為牛肉膏蛋白胨培養基;
S22.發酵培養:將種子液按2v/v%的比例接種到添加有木質纖維素水解液的發酵培養液中,30℃、180rpm振蕩培養24h。
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