[發(fā)明專利]一種抗血栓的麥冬皂苷組合物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510140472.1
• 申請(qǐng)日: 2015-03-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104873746B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張劍;董迪;陳維
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱泰華藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K31/704
• 分類號(hào): A61K31/704;A61K36/8968;A61P7/02;G01N30/90;G01N30/02;G01N30/36
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1.一種抗血栓的麥冬皂苷組合物的分析鑒定方法，其特征在于：

麥冬皂苷組合物的制備方法如下：

取麥冬，加水浸泡6-18h，打碎，再加水煎煮0.5-6h，兩次，提取液過(guò)濾，靜置放涼后，離心，棄去不溶物，上清液過(guò)D-101樹(shù)脂柱吸附，重復(fù)上樣一次，靜置6-18h，先以水洗脫至洗脫液molish反應(yīng)呈陰性，再以30％的乙醇溶液洗脫，最后用85％的乙醇溶液洗脫，洗脫液分別回收溶劑，將30％乙醇部位和85％乙醇部位混合，凍干，得麥冬皂苷組合物；

麥冬皂苷組合物的薄層色譜定性鑒別

取麥冬皂苷組合物，1ml甲醇溶解，LC-C18SPE固相萃取小柱吸附，分別用水、40％、75％、85％甲醇溶液各8ml洗脫，收集75％洗脫部位，揮干溶劑，用少量甲醇溶解，備用；

展開(kāi)系統(tǒng)如下：

丙酮-乙酸乙酯-水-乙酸，5∶5∶1∶0.2；

麥冬皂苷組合物的HPLC-ELSD色譜，

用HPLC-ELSD進(jìn)行成分定性測(cè)定；

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18，4.6×250mm，5μm；

色譜條件：甲醇-水梯度洗脫，洗脫條件；

總皂苷HPLC-ELSD色譜條件

麥冬多糖含量測(cè)定方法，

標(biāo)準(zhǔn)品與供試品的制備

標(biāo)準(zhǔn)品的制備：精密稱取80℃烘至恒重的果糖8.30mg，置100ml容量瓶中，用甲醇溶解，并定容，得0.083mg/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻，備用；

供試品的制備：精密稱取麥冬皂苷組合物樣品適量，放至10ml容量瓶中，甲醇溶解并定容，搖勻，備用；

最大吸收波長(zhǎng)的選擇

精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液7ml，用甲醇稀釋并定容至10ml；取供試品溶液2.5ml至10ml容量瓶中，用甲醇稀釋并定容；分別精密量取甲醇，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后溶液，供試品稀釋后溶液2ml至具塞試管中，各加入5％苯酚溶液1ml，再迅速沿管壁加入5ml濃硫酸，40℃水浴反應(yīng)15min，冰水浴3min終止反應(yīng)，放至室溫，在波長(zhǎng)400～760nm處掃描，選擇最大吸收波長(zhǎng)為490nm；

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密量取果糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液1、2、3、5、7ml至10ml容量瓶中，甲醇稀釋并定容，制成0.0083mg/ml、0.0166mg/ml、0.0249mg/ml、0.0415mg/ml、0.0581mg/ml的一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別從各標(biāo)準(zhǔn)品溶液中精密量取2ml至具塞試管中，按照上述“最大吸收波長(zhǎng)的選擇”項(xiàng)下的方法顯色，以隨行空白溶液為參比溶液，在波長(zhǎng)490nm下測(cè)定吸光度，以濃度mg/ml為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y＝13.38x-0.002，r＝0.9998，n＝3，果糖在8.3μg/ml～58.1μg/ml范圍內(nèi)線性良好；

樣品測(cè)定

精密量取麥冬皂苷組合物供試品溶液2.5ml至10ml容量瓶中，甲醇稀釋并定容；精密量取2ml稀釋后供試品溶液至10ml具塞試管中，顯色，以隨行空白溶液為參比溶液，在波長(zhǎng)490nm下測(cè)定吸光度，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各個(gè)樣品的多糖含量。