[發(fā)明專利]一種具有降尿酸活性的秋刀魚美拉德肽及其制法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510094674.7
• 申請日: 2015-03-03
• 公開（公告）號: CN104664039B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙謀明;劉洋;蘇國萬;趙容鐘;趙強(qiáng)忠;林戀竹
• 申請（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類號: A23J1/04
• 分類號: A23J1/04;A61K38/02;A61P19/06
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司44245
• 代理人: 郭煒綿

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種具有降尿酸活性的秋刀魚美拉德肽及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

尿酸是人體嘌呤代謝的產(chǎn)物。正常狀態(tài)下，人體血尿酸含量為200～410μmol/L，女性普遍低于男性。人體尿酸水平的升高通常與人體嘌呤代謝異常或腎臟排泄異常息息相關(guān)，國際上將男性血尿酸濃度超過420μmol/L、女性超過357μmol/L時定義為高尿酸血癥。而高尿酸血癥往往會引起通風(fēng)。痛風(fēng)在公元前2640年即被埃及人定義，并于公元前400年被記錄到希波克拉底的醫(yī)學(xué)著作中。如今，由于飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變，高尿酸血癥及痛風(fēng)患者也隨之增加，已成為現(xiàn)代社會常見的一種風(fēng)濕性疾病。

人們一般很少關(guān)注自已的血尿酸水平，往往是等到出現(xiàn)了痛風(fēng)的癥狀才采取治療。目前以消炎、鎮(zhèn)痛治療為主，如秋水仙堿及非甾體抗炎藥物，持續(xù)用藥1到2周后能明顯改善痛風(fēng)癥狀。吲哚美辛也能夠治療急性痛風(fēng)，而注射促腎上腺皮質(zhì)激素具有更好的、更快速的療效。別嘌呤醇是目前市面上唯一一款通過抑制黃嘌呤氧化酶活性而減少尿酸生成、降低血尿酸濃度的藥物，其作用靶點(diǎn)明確，但起效慢，且在使用初期會加劇痛風(fēng)癥狀。但無論是消炎、鎮(zhèn)痛藥物，還是作用機(jī)理明確的別嘌呤醇藥物，在治療時往往會出現(xiàn)一定的毒副作用，因此對于已患有痛風(fēng)石的患者多采取手術(shù)剔除痛風(fēng)石、矯正關(guān)節(jié)來進(jìn)行治療。而在無癥狀高尿酸血癥的治療中，醫(yī)生建議通過調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)或口服一些食源性的藥物來進(jìn)行治療，達(dá)到緩慢降低血尿酸水平的目的。

蛋白質(zhì)是我們?nèi)粘Ｉ钪斜夭豢缮俚臓I養(yǎng)元素，且在蛋白質(zhì)中蘊(yùn)含著很多的生物活性物質(zhì)——生物活性肽，其中可能具有降血壓、降膽固醇、抗血栓、抗癌、抗氧化等生物活性。但這些生物活性肽隱藏在蛋白質(zhì)內(nèi)部或僅是蛋白質(zhì)的某個基因片段，當(dāng)人們攝食這些蛋白質(zhì)食物時，蛋白質(zhì)進(jìn)入人體胃和腸道中，這些生物活性肽也不能被胃和腸道中酶系作用而完全釋放出來。現(xiàn)代生物酶解技術(shù)是一種可高效釋放蛋白質(zhì)內(nèi)部生物活性肽的方法，該法主要是模仿人體內(nèi)消化系統(tǒng)的蛋白水解過程，且由于是在體外作用，其水解條件和蛋白酶的種類和濃度均可調(diào)整，所以可高效獲取目標(biāo)生物活性的生物活性肽。

另外，美拉德反應(yīng)是食品加工或儲存過程中常發(fā)生于還原糖與氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)或任何含氮化合物之間的非酶褐變反應(yīng)，其反應(yīng)歷程較快，內(nèi)部的成分變化復(fù)雜，甚至?xí)赡承┚哂休^強(qiáng)生物活性的物質(zhì)，如目前報道較多的是美拉德反應(yīng)可以顯著增強(qiáng)蛋白肽的抗氧化活性，因此，美拉德反應(yīng)也是一種提升蛋白肽生物活性的有效的處理手段之一。

秋刀魚屬于海洋中上層魚類，其肉含有豐富的蛋白質(zhì)，但附加值較低，主要作為食用或飼料，價格低廉。目前已有通過生物酶解制備抗氧化肽的研究，仍未見利用秋刀魚來制備降尿酸組分的研究。如果以秋刀魚為原料制備出具有明顯降低尿酸的蛋白肽產(chǎn)品，不僅可拓展秋刀魚的應(yīng)用領(lǐng)域和提高其經(jīng)濟(jì)價值，更重要的可改善人們的生活質(zhì)量，具有極大的社會意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的首要目的在于提供一種具有降尿酸活性的秋刀魚美拉德肽的制備方法，該方法的創(chuàng)新點(diǎn)在于實(shí)現(xiàn)酶解與美拉德反應(yīng)的連續(xù)作用，以及外加單體氨基酸作為酶解體系的底物抑制劑來達(dá)到調(diào)節(jié)酶解進(jìn)程的目的。

本發(fā)明的另一目的在于提供由上述方法制得的具有降尿酸活性的秋刀魚美拉德肽。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述的秋刀魚美拉德肽的用途。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種具有降尿酸活性的秋刀魚美拉德肽的制備方法，包括以下步驟：

(1)秋刀魚預(yù)處理：秋刀魚去頭、去內(nèi)臟，清洗干凈，過絞肉機(jī)絞碎，加入秋刀魚碎肉質(zhì)量3～5倍的水，在40～50℃下加熱攪拌1～2小時，調(diào)節(jié)體系pH值至4.2，繼續(xù)攪拌加熱1～1.5小時，離心分離，棄除上清液和上層油脂，取沉淀物；

(2)酶解-美拉德連續(xù)發(fā)應(yīng)：往秋刀魚沉淀物中加入其質(zhì)量1～1.5倍的水，然后加入蛋白酶和單體氨基酸，調(diào)節(jié)體系pH值至7.0，在50～55℃下保溫水解6～9小時后，加入還原糖，在100～121℃下加熱1.0～2.0小時，離心，取上清液，得到秋刀魚美拉德肽液；將美拉德肽液真空濃縮、噴霧干燥，得到秋刀魚美拉德肽干粉；

以秋刀魚沉淀物的質(zhì)量為計(jì)算基準(zhǔn)，蛋白酶的加入量占1.5～3.0％，單體氨基酸的加入量占0.1～0.3％，還原糖的加入量占0.5～2.5％；

所述的調(diào)節(jié)體系pH值是用0.5mol/L的NaOH溶液或HCl溶液調(diào)節(jié)；

所述的離心是5000r/min離心15～20min；