[發(fā)明專利]一種香榧芽體內源激素的檢測方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510092900.8 | 申請日： | 2015-03-02 |
| 公開（公告）號： | CN104749383A | 公開（公告）日： | 2015-07-01 |
| 發(fā)明（設計）人： | 梅麗;吳家勝;黃堅欽;劉穎坤 | 申請（專利權）人： | 浙江農(nóng)林大學 |
| 主分類號： | G01N33/74 | 分類號： | G01N33/74 |
| 代理公司： | 四川君士達律師事務所 51216 | 代理人： | 芶忠義 |
| 地址： | 311300 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 香榧 體內 激素 檢測 方法 | ||
1.一種香榧芽體內源激素的檢測方法，其特征在于：具體包括以下步驟：
1)采集香榧花芽置于提取液中4℃過夜浸提，3500轉/min離心15min，取上清液；
2)上清液過C-18固相萃取柱，萃取液濃縮，除去甲醇用稀釋液定容；
3)在96孔酶標板中分別加入標準物、待測樣和加有抗體的稀釋液，每孔50μl；
4)洗版4次，將加入酶標二抗的稀釋液中加入酶標板，每孔加100μl，在濕盒內，置37℃下，溫育0.5h，洗板；
5)稱取鄰苯二胺溶于底物緩沖液中溶解，并添加30％H202，，在每孔中加100μl，放入濕盒內，顯色適當后每孔加入50μl?2mol/L硫酸終止反應；
6)在酶聯(lián)免疫分光光度計上依次測定標準物各濃度和各樣品490nm處的OD值。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種香榧芽體內源激素的檢測方法，其特征在于：所述的提取液為將二叔丁基對甲苯酚的甲醇溶液，其中甲醇的濃度為80％，二叔丁基對甲苯酚的濃度為1mmol/L。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種香榧芽體內源激素的檢測方法，其特征在于：所述的稀釋液通過在500ml?PBS中加0.5ml?Tween-20和0.5g明膠后加熱制得。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種香榧芽體內源激素的檢測方法，其特征在于：所述的底物緩沖液為通過稱取5.10g?C6H8O7·H2O，18.43g?Na2HPO4·12H2O，加1000ml蒸餾水和1ml?Tween-20制得pH為5.0的溶液。
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