[發(fā)明專利]一種酶解修飾的銅藻多糖及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510092196.6
• 申請日: 2015-02-18
• 公開（公告）號: CN104673859B
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 邵平;邵佳美;陳曉曉;孫培龍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;俞慧

一種酶解修飾的銅藻多糖及其應(yīng)用，所述酶解修飾的銅藻多糖的制備方法包括：(1)銅藻多糖微波提取，得到多糖粗提液；(2)分級醇沉：取多糖粗提液，先后在最終乙醇體積分?jǐn)?shù)為30～40％和55～65％的條件下進(jìn)行沉淀操作，得到SHP60粗多糖組分；(3)SHP60粗多糖組分經(jīng)脫色、脫蛋白得到SHPA多糖；(4)SHPA多糖用葡聚糖酶酶解，得到酶解產(chǎn)物；(5)酶解產(chǎn)物用DEAE?Sepharose Fast Flow離子柱層析系統(tǒng)進(jìn)行離子柱層析，洗脫液經(jīng)濃縮、過濾得到濾液；(6)步驟(5)所得濾液用Sephadex G?25凝膠層析系統(tǒng)進(jìn)行凝膠柱層析，收集不含鹽的多糖部分，濃縮，冷凍干燥得到酶解修飾的銅藻多糖。所述酶解修飾的銅藻多糖可用于制備抗氧化劑、吸濕劑和保濕劑。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種酶解修飾的銅藻多糖及其在制備抗氧化劑、吸濕劑和保濕劑中的應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

多糖(polysaccharide)是一類結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜、分子量巨大的碳水化合物，通常由多個單糖經(jīng)脫水、縮合而形成。自然界中的多糖類化合物廣泛地分布于生物體內(nèi)中，是生命有機(jī)體的重要組成成分。海藻多糖結(jié)構(gòu)復(fù)雜，生物活性顯著且多樣：其抗氧化、抗衰老的作用，是利用了海藻多糖能夠抑制自由基的活性；促進(jìn)免疫、抗腫瘤的作用，主要是通過提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力來實現(xiàn)；降血糖、降血脂的作用，是利用了多糖的吸附性；而抗凝血作用，是因為海藻多糖大部分是硫酸酯多糖，它抗凝血作用機(jī)理同肝素作用機(jī)理相似。另外海藻多糖還具有很好的吸濕保濕性和美白抗輻射作用。

據(jù)《中華海洋本草》記載，自古以來銅藻作為中藥“海菌”使用。其性咸、味寒，歸肝、胃、腎經(jīng)，有消痰軟堅、清熱利水的功效，可以又來治療水腫或腳氣浮腫、甲狀腺腫、頸淋巴結(jié)腫、癭瘤、瘰痛、等疾病。《神農(nóng)本草經(jīng)》中對其也有記錄，如：“主癭瘤氣，頸下核，破散結(jié)氣，癰腫，瘕堅氣腹中上下鳴，下十二水腫”。通過野外實地調(diào)查和民間訪問考察發(fā)現(xiàn)，我國廣東、海南沿海等地的居民多將其作為“海藻”藥材全藻入藥使用，是一種重要的海藻資源。但目前的研究表明天然銅藻多糖的結(jié)構(gòu)并不均一、活性基團(tuán)含量相對有限。通過有目的地修飾多糖能有效提高多糖的溶解性和生物活性。

生物酶法修飾多糖主要指酶法降解多糖，是利用專一性酶或非專一性酶對多糖進(jìn)行生物降解而得到低分子量多糖或寡糖的一種降解手段。由于化學(xué)和物理降解方法存在反應(yīng)條件不易控制、降解產(chǎn)物分子量分布寬、不均一等、副產(chǎn)物多缺點，因此很難應(yīng)用到工業(yè)生產(chǎn)中。而酶降解法可特異性地、選擇性地切斷糖苷鍵，得到均一降解產(chǎn)物，并且在反應(yīng)過程中底物的有效功能基團(tuán)和寡糖的自身結(jié)構(gòu)不會遭到破壞，因此產(chǎn)物的活性較高。另外與化學(xué)降解相比，酶降解反應(yīng)條件溫和、易控制，不需要加入大量的化學(xué)試劑，減少對環(huán)境的污染，并且降解速度快，是一種較為理想的降解方法。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是針對上述天然銅藻多糖存在的問題，提供一種分子片段均一、抗氧化性和吸濕保濕性能明顯提高的酶解修飾的銅藻多糖以及該多糖在制備抗氧化劑、吸濕劑和保濕劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明提供了一種酶解修飾的銅藻多糖，其制備方法包括：

(1)銅藻多糖微波提取：銅藻粉末用95％乙醇進(jìn)行微波提取，提取結(jié)束后經(jīng)冷凍離心分離得到多糖粗提液；

(2)分級醇沉：取多糖粗提液，在最終乙醇體積分?jǐn)?shù)為30～40％的條件下進(jìn)行沉淀操作，冷凍離心得到沉淀a和上清液a；

取上清液a在最終乙醇體積分?jǐn)?shù)為55～65％的條件下進(jìn)行沉淀操作，沉淀完全后經(jīng)冷凍離心得到沉淀b和上清液b，沉淀b經(jīng)水溶、蒸發(fā)、冷凍干燥得到SHP60粗多糖組分；

(3)SHP60粗多糖組分經(jīng)脫色、脫蛋白得到SHPA多糖；