[發明專利]鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的成套引物

有效

• 申請號: 201510084410.3
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104611452B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發明（設計）人: 楊臘英;黃俊生;劉磊;郭立佳;汪軍;梁昌聰;王國芬;陳平亞;師雪茹
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院環境與植物保護研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 關暢,任鳳華

技術領域

本發明涉及生物技術領域中鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的成套引物。

背景技術

尖孢鐮刀菌(Fusarium?oxysporum)是一種世界性分布的土傳病原真菌，寄主范圍廣泛，可引起瓜類、茄科、香蕉、棉、豆科及花卉等100多種植物枯萎病的發生。盡管尖孢鐮刀菌在整體上具有廣泛的寄主范圍，但單個菌株僅能侵染一種或少數幾種植物種類。在不同的寄主上又分為不同的生理專化型，目前已報道的生理?；陀?50多種，有些?；鸵罁Σ煌贩N的特異性被進一步劃分為不同的生理小種，大多數?；桶?個或更多的生理小種，而一小部分是單型。某生理?；涂赡茉谔囟ǖ闹参锓N類上引起病害，但是屬于其他?；偷木陮ν瑯拥倪@種特定植物種類可能無害甚至對其有利。

香蕉枯萎病，又稱香蕉鐮刀菌枯萎病、巴拿馬病、黃葉病，是由尖孢鐮刀菌古巴專化型(Fusarium?oxyporum?f.sp.Cubense，Foc)引起的破壞植株維管束而導致植株死亡的一種毀滅性病害，目前，除地中海、印度洋、南太平洋一些島嶼國家外，幾乎所有香蕉種植區均有遭受該病害危害的報導。依據尖孢鐮刀菌古巴專化型(Foc)對不同品種香蕉的侵染特異性將其劃分為4個生理小種(race)：其中1號生理小種(Foc1)侵染“大蜜哈”[Gros?michel(AAA)]、Silk(AAB)、Taiwan?Latundan(AAB)、IC2(AAAA)和粉蕉(ABB)；2號生理小種(Foc2)只侵染雜種三倍體Bluggoe及ABB基因型的相關煮食蕉類；3號生理小種侵染野生揭尾蕉屬(Heliconia?spp.)而不是香蕉類，因而被劃分出Foc；4號生理小種(Foc4)則侵染所有的Cavendish類香蕉(AAA)及其他對1號與2號生理小種敏感的蕉類。基于Foc4是否能在熱帶環境條件下對Cavendish類香蕉致病，又將Foc4進一步劃分為“尖孢鐮刀菌古巴?；蜔釒?號生理小種”(TR4)與“尖孢鐮刀菌古巴?；蛠啛釒?號生理小種”(ST4)，尖孢鐮刀菌古巴?；蛠啛釒?號生理小種僅在亞熱帶條件下侵染Cavendish類香蕉。我國廣東、廣西、福建、海南、云南和臺灣等主要香蕉種植區也均已發現香蕉枯萎病，且香蕉枯萎病的發病加重趨勢明顯。目前急需一套快速鑒定香蕉是否感染香蕉枯萎病菌的方法，為生產安全健康香蕉種苗保駕護航。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何鑒定香蕉枯萎病菌中的尖孢鐮刀菌古巴?；秃?或尖孢鐮刀菌古巴?；?號生理小種。

為解決上述技術問題，本發明提供了鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的成套引物，其名稱為成套引物甲。

本發明所提供的成套引物甲，由名稱為A的PCR引物對和名稱為B的PCR引物對組成；

所述A由序列表中SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成；所述B由序列表中SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示的兩條單鏈DNA組成。

本發明所要解決的另一個技術問題是如何鑒定香蕉枯萎病菌中的尖孢鐮刀菌古巴?；汀?/p>

為解決上述技術問題，本發明提供了鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對。

本發明所提供的鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對，為所述B。

本發明所要解決的再一個技術問題是如何鑒定香蕉枯萎病菌中的尖孢鐮刀菌古巴專化型4號生理小種。

為解決上述技術問題，本發明提供了鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對。

本發明所提供的鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對，為所述A。

為解決上述技術問題，本發明還提供了鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統。

本發明所提供的鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統為下述Ll-Nn中的任一種：

Ll、含有所述成套引物甲的系統；

Mm、含有所述B的系統；

Nn、含有所述A的系統。

上述鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統，可包括通過PCR鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌所需的試劑和儀器。具體來說，鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統可包括所述成套引物甲、所述B或所述A以及PCR所需要的其它試劑和儀器。

上述鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統還可僅包括所述成套引物甲、所述B或所述A。