[發明專利]鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的成套引物有效
| 申請號: | 201510084410.3 | 申請日: | 2015-02-16 |
| 公開(公告)號: | CN104611452B | 公開(公告)日: | 2017-03-08 |
| 發明(設計)人: | 楊臘英;黃俊生;劉磊;郭立佳;汪軍;梁昌聰;王國芬;陳平亞;師雪茹 | 申請(專利權)人: | 中國熱帶農業科學院環境與植物保護研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司11245 | 代理人: | 關暢,任鳳華 |
| 地址: | 571101 海*** | 國省代碼: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 鑒定 輔助 香蕉 枯萎 病菌 成套 引物 | ||
1.鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的成套引物,其特征在于:所述成套引物由名稱為A的PCR引物對和名稱為B的PCR引物對組成;
所述A由序列表中SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成;所述B由序列表中SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示的兩條單鏈DNA組成。
2.鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對,其特征在于:所述PCR引物對為權利要求1所述B。
3.鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的PCR引物對,其特征在于:所述PCR引物對為權利要求1所述A。
4.鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的系統,其特征在于:所述系統為下述Ll-Nn中的任一種:
Ll、含有權利要求1所述成套引物的系統;
Mm、含有權利要求1所述B的系統;
Nn、含有權利要求1所述A的系統。
5.根據權利要求4所述的系統,其特征在于:所述系統還包括DNA聚合酶。
6.鑒定或輔助鑒定香蕉枯萎病菌的方法,為下述L1)或L2):
L1)下述L11)和L12):
L11)以待測生物樣品的核酸為模板,用權利要求1所述A進行PCR擴增得到PCR產物A1;以所述待測生物樣品的RNA或以RNA為模板轉錄得到的cDNA為模板,用權利要求1所述B進行PCR擴增得到PCR產物B1;
L12)檢測L11)所述PCR產物A1和所述PCR產物B1的大小,如果所述PCR產物B1中含有500bp-750bp的DNA片段,所述PCR產物A1中含有500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品含有或候選含有尖孢鐮刀菌古巴專化型4號生理小種;如果所述PCR產物B1中含有500bp-750bp的DNA片段,所述PCR產物A1中不含500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品含有或候選含有尖孢鐮刀菌古巴專化型,所述尖孢鐮刀菌古巴專化型不為尖孢鐮刀菌古巴專化型4號生理小種;如果所述PCR產物B1中不含500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品不含或候選不含尖孢鐮刀菌古巴專化型;
L2)下述L21)和L22):
L21)以待測生物樣品的核酸為模板,用權利要求1所述A進行PCR擴增得到PCR產物A2;以所述待測生物樣品的DNA為模板,用權利要求1所述B進行PCR擴增得到PCR產物B2;
L22)檢測L21)所述PCR產物A2和所述PCR產物B2的大小,如果所述PCR產物B2中含有500bp-750bp的DNA片段,所述PCR產物A2中含有500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品含有或候選含有尖孢鐮刀菌古巴專化型4號生理小種;如果所述PCR產物B2中含有500bp-750bp的DNA片段,所述PCR產物A2中不含500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品含有或候選含有尖孢鐮刀菌古巴專化型,所述尖孢鐮刀菌古巴專化型不為尖孢鐮刀菌古巴專化型4號生理小種;如果所述PCR產物B2中不含500bp-750bp的DNA片段,所述待測樣品不含或候選不含尖孢鐮刀菌古巴專化型。
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