[發(fā)明專利]一種假交替單胞菌發(fā)酵生產(chǎn)卡拉膠酶的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510084198.0
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104611315A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖安風(fēng);蔡慧農(nóng);倪輝;許彩云;朱艷冰;楊秋明;陳艷紅;姜澤東;杜希萍;楊遠帆;黃高凌;李利君
• 申請（專利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種食鹿角菜假交替單胞菌ASY5發(fā)酵生產(chǎn)卡拉膠酶的培養(yǎng)基，其特征在于：包括菌種活化培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基及發(fā)酵培養(yǎng)基；

所述菌種活化培養(yǎng)基為：牛肉膏?10?g/L，胰蛋白胨?10?g/L?，瓊脂?20?g/L，NaCl?21.1?g/L?，KCl?0.58?g/L?，CaCl₂?0.811?g/L?，MgCl₂·6H₂O?3.6?g/L?，NaHCO₃?0.083?g/L?，MgSO₄·7H₂O?2.625?g/L?，調(diào)pH到7.3，121℃滅菌20?min；

所述種子培養(yǎng)基為：牛肉膏?10?g/L，胰蛋白胨?10?g/L?，NaCl?21.1?g/L?，KCl?0.58?g/L?，CaCl₂?0.811?g/L?，MgCl₂·6H₂O?3.6?g/L?，NaHCO₃?0.083?g/L?，MgSO₄·7H₂O?2.625?g/L?，調(diào)pH到7.3，121℃滅菌20?min；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基為：卡拉膠?2.5?g/L?，胰蛋白胨?3.0?g/L?，NaCl?30.0?g/L?，KCl?0.1?g/L?，MgSO₄·7H₂O?3.0?g/L?，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?0.0366?g/L?，Na₂HPO₄·12H₂O?3.78?g/L?，NaH₂PO₄·2H₂O1.3?g/L?，CaCl₂?0.2?g/L?，121℃滅菌20?min。

2.一種如權(quán)利要求1所述的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5生產(chǎn)卡拉膠酶的發(fā)酵方法，其特征在于：包括以下步驟：

種子的活化與制備：將上述食鹿角菜假交替單胞菌ASY5菌種接至菌種活化培養(yǎng)基中，20℃培養(yǎng)24?h，再接至裝有種子培養(yǎng)基的搖瓶中，20℃培養(yǎng)24?h，獲得搖瓶種子液；

搖瓶發(fā)酵：搖瓶種子液接種至裝有適用于食鹿角菜假交替單胞菌ASY5產(chǎn)卡拉膠酶發(fā)酵培養(yǎng)基的搖瓶之中，20℃培養(yǎng)72?h，獲得含有卡拉膠酶的發(fā)酵液；

罐上發(fā)酵：搖瓶種子液接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的7?L發(fā)酵罐中，20℃培養(yǎng)72?h，獲得含有卡拉膠酶的發(fā)酵液；

中試放大發(fā)酵：搖瓶種子液接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的20?L的發(fā)酵罐中，20℃培養(yǎng)72?h，獲得含有卡拉膠酶的發(fā)酵液；或者搖瓶種子液接種至裝有種子培養(yǎng)基的7L發(fā)酵罐中，20℃培養(yǎng)24h，獲得發(fā)酵罐種子液，再將發(fā)酵罐種子液接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的200?L發(fā)酵罐中，20℃培養(yǎng)72h，獲得含有卡拉膠酶的發(fā)酵液。

3.如權(quán)利要求2所述的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5生產(chǎn)卡拉膠酶的發(fā)酵方法，其特征在于：所述種子的活化與制備步驟，將-20℃保藏的甘油管菌種解凍后接于裝有菌種活化培養(yǎng)基的平板，20℃培養(yǎng)24?h，獲得活化的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5菌種；然后從平板上挑取培養(yǎng)好的菌種于裝有40?mL種子培養(yǎng)基的250?mL搖瓶中，20℃，180?r/min發(fā)酵24?h，獲得搖瓶種子液。

4.如權(quán)利要求2所述的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5生產(chǎn)卡拉膠酶的發(fā)酵方法，其特征在于：所述搖瓶發(fā)酵，將培養(yǎng)好的搖瓶種子液以2%的接種量接入裝有50?mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250?mL搖瓶中，20℃，180?r/min發(fā)酵72?h。

5.如權(quán)利要求2所述的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5生產(chǎn)卡拉膠酶的發(fā)酵方法，其特征在于：所述罐上發(fā)酵，將培養(yǎng)好的搖瓶種子液按照2%的接種量接入裝有5?L發(fā)酵培養(yǎng)基的7?L發(fā)酵罐中，20℃，400?r/min發(fā)酵72?h。

6.如權(quán)利要求2所述的食鹿角菜假交替單胞菌ASY5生產(chǎn)卡拉膠酶的發(fā)酵方法，其特征在于：所述中試放大發(fā)酵，將培養(yǎng)好的種子按照2%的接種量接入裝有10?L發(fā)酵培養(yǎng)基的20?L罐中，20℃，150?r/min發(fā)酵72?h。