[發(fā)明專利]注射用A群鏈球菌藥物的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510082767.8
• 申請(qǐng)日: 2015-02-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104644693B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邢晉華;王成華;張守洋;宋昭震;李京平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)藥集團(tuán)魯亞（山東）制藥有限公司
• 主分類號(hào): A61K35/744
• 分類號(hào): A61K35/744;A61K9/19;A61K47/22;A61P35/00
• 代理公司: 濟(jì)寧眾城專利事務(wù)所 37106
• 代理人: 李效寧

1.一種注射用A群鏈球菌藥物的制備方法，其特征在于組分含量按質(zhì)量份是：A群鏈球菌（Streptococcus A Group）占3~6份，麥芽糖占13~26份，蛋氨酸占55~75份，氯化鈉占0.3~0.5份，青霉素G鉀占6~12份；配制規(guī)格為1KE的藥物1萬(wàn)支按順序包括以下步驟：

a. A群鏈球菌冷凍管活化及血瓊脂斜面培養(yǎng)：取凍干管一支，直接加入無(wú)菌生理鹽水溶解后，接入5％酵母粉培養(yǎng)基中于37±0.5℃±活化培養(yǎng)18-24小時(shí)，然后涂片鏡檢，確認(rèn)鏈球菌生長(zhǎng)正常無(wú)污染后，將菌株接入血瓊脂斜面于37±0.5℃培養(yǎng)18-24小時(shí)；

b.接種培養(yǎng)：采用三級(jí)培養(yǎng)法，第一級(jí)培養(yǎng)系將菌種從血瓊脂斜面接種入一級(jí)酵母浸膏粉培養(yǎng)基內(nèi)于37±0.5℃培養(yǎng)20小時(shí)，培養(yǎng)液經(jīng)涂片鏡檢，確認(rèn)鏈球菌生長(zhǎng)正常無(wú)污染后，按5% v/v的接種量接入二級(jí)酵母浸膏粉培養(yǎng)基中，于37±0.5℃培養(yǎng)20小時(shí)，與接種二級(jí)同樣的方法，將菌種接入三級(jí)酵母粉培養(yǎng)基內(nèi)，于37±0.5℃培養(yǎng)20小時(shí)；

c.滅活：取3級(jí)培養(yǎng)的A群鏈球菌菌體，經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，經(jīng)無(wú)菌0.9%氯化鈉溶液分三次洗去殘余培養(yǎng)基，獲得生產(chǎn)用A群鏈球菌菌體；加入12萬(wàn)μ/ml青霉素G鉀的10%麥芽糖的無(wú)菌溶液400ml，pH值為7.5，37℃水浴加入30分鐘后，繼續(xù)升溫至45℃加熱20分鐘；

d.配制：向上述菌液中加入繼續(xù)加入12萬(wàn)μ/ml青霉素G鉀的0.9%氯化鈉無(wú)菌溶液100ml搖勻，本溶液用磷酸二氫鉀和氫氧化鈉將pH值預(yù)調(diào)至7.5；取樣后，按2000版?中國(guó)生物制品規(guī)程?中規(guī)定的濃度測(cè)定方法測(cè)含量，補(bǔ)加按1- 2%無(wú)菌蛋氨酸溶液至1萬(wàn)ml，本溶液用磷酸二氫鉀和氫氧化鈉將pH值預(yù)調(diào)至7.5，攪勻，灌裝，每瓶裝量1ml；

e.冷凍干燥：將灌裝好的藥液，半壓塞放入凍干機(jī)內(nèi)，制品通過(guò)擱板降溫，在-40℃預(yù)凍2小時(shí)，然后抽真空至0.3-0.4mbar，經(jīng)過(guò)擱板加熱，在12小時(shí)內(nèi)逐漸升溫至0℃，抽真空至0.09-0.15mbar，在4小時(shí)內(nèi)逐漸升溫至30℃，維持30 ℃干燥3小時(shí)，凍干結(jié)束，壓塞、壓鋁蓋出箱，即制得成品。