[發明專利]一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌及其懸浮劑

有效

• 申請號: 201510082296.0
• 申請日: 2015-02-15
• 公開（公告）號: CN104673720B
• 公開（公告）日: 2017-07-11
• 發明（設計）人: 王貽蓮;李紀順;扈進冬;楊合同;謝雪迎
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/11
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司37205
• 代理人: 于曉曉

1.一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌，其特征在于，巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium BMJBN02，于2015年1月30日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC NO.10478。

2.一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，將權利要求1所述的巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium BMJBN02發酵得到的發酵液與表面活性劑、防腐劑、懸浮助劑和增稠劑混合制備懸浮劑。

3.根據權利要求2所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，由以下步驟制得：

(1)種子液的獲得：將生防菌BMJBN02接種到液體LB培養基，30℃，200rpm振蕩培養12～18小時，取樣測定600nm處的OD值，測定過程中以未接種的液體LB培養基調零；

(2)發酵液的獲得：當步驟(1)中OD值為0.5～0.8時，將種子液按1:150體積比加入裝有發酵培養基的發酵罐培養得到發酵液；

(3)巨大芽孢桿菌BMJBN02懸浮劑的制備：將制備的BMJBN02菌的發酵液與表面活性劑、防腐劑、懸浮助劑和增稠劑混合制備懸浮劑。

4.根據權利要求3所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(1)中液體LB培養基配方：1％NaCl，1％蛋白胨，0.5％酵母粉，pH7.0～7.5。

5.根據權利要求3所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(2)中發酵條件為：培養溫度30℃，轉速220r/min，發酵時間為36～48h，發酵液PH維持在7.0，溶氧量30％，通氣量7～9m³/小時，罐壓0.05～0.1KPa，產孢率為88％，活菌計數5.33×10⁹CFU·mL^-1。

6.根據權利要求3所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(2)中發酵培養基配方：玉米粉2％，豆粕粉1％，酵母粉0.3％，CaCl₂ 0.1％，MgSO₄·7H₂O 0.05％，K₂HPO₄·3H₂O 0.3％，KH₂PO₄ 0.2％，pH7.0～7.5。

7.根據權利要求3所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(3)中懸浮助劑是硫酸銨，防腐劑是甘氨酸，表面活性劑是有機硅BD-3077，增稠劑是黃原膠。

8.根據權利要求3所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(3)中，將制備的BMJBN02菌的發酵液與按質量百分比的硫酸銨6％～8％，甘氨酸2％～5％，BD-3077 0.05％～0.1％，黃原膠0.2％～0.3％混合制備懸浮劑，所得懸浮劑中BMJBN02活菌計數5×10⁹cfu·mL^-1，以上各組份的用量均以BMJBN02菌的發酵液的質量為基數。

9.根據權利要求8所述的一種用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢桿菌的懸浮劑，其特征在于，步驟(3)中，先將硫酸銨攪拌下加入BMJBN02菌的發酵液中，待硫酸銨全部溶解后，在攪拌下依次加入防腐劑甘氨酸、表面活性劑有機硅BD-3077、增稠劑黃原膠，攪拌均勻即可。