[發(fā)明專(zhuān)利]一種高精度改良Nitsch(含固定介質(zhì)和碳源)培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510082201.5
• 申請(qǐng)日: 2015-02-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104642116A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 錢(qián)家靜
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 錢(qián)家靜
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 無(wú)
• 代理人: 無(wú)

1.一種高精度改良Nitsch(含固定介質(zhì)和碳源)培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有準(zhǔn)確計(jì)算、精確稱(chēng)量、先少后多地混合、密封、單獨(dú)母液制備、啟封使用等六個(gè)步驟。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六個(gè)步驟具體操作如下：

①準(zhǔn)確計(jì)算：將改良Nitsch基本培養(yǎng)基所含的15種元素?cái)U(kuò)大1000倍，即七水硫酸鋅0.05g，鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素和泛酸鈣各0.25g，硼酸0.5g，煙酸1.25g，四水硫酸錳3g，甘氨酸7.5g，檸檬酸鐵10g，七水硫酸鎂125g，磷酸二氫鉀125g，硝酸鉀125g，四水硝酸鈣500g，瓊脂粉5000g，蔗糖30000g；2種元素二水鉬酸鈉和五水硫酸銅擴(kuò)大10000倍，即各0.25g；

②精確稱(chēng)量：按照①中計(jì)算的結(jié)果準(zhǔn)確稱(chēng)量，尤其是要用萬(wàn)分之一天平準(zhǔn)確稱(chēng)量各0.25g的二水鉬酸鈉和五水硫酸銅；

③先少后多地混合：按照量的少多進(jìn)行先后混合，即按照七水硫酸鋅，鹽酸吡哆醇，鹽酸硫胺素，泛酸鈣各，硼酸，煙酸，四水硫酸錳，甘氨酸，檸檬酸鐵，七水硫酸鎂，磷酸二氫鉀，硝酸鉀，四水硝酸鈣，瓊脂粉，蔗糖的順序混合均勻，共計(jì)30898.05g；

④密封：將混合后的固體基質(zhì)按照100g每瓶的要求分裝于塑料容器中，并進(jìn)行密封；

⑤單獨(dú)母液制備：二水鉬酸鈉和五水硫酸銅各稱(chēng)量0.25g，溶于1L蒸餾水中，配制成10000倍母液；

⑥啟封使用：根據(jù)需要，每1L蒸餾水中加入準(zhǔn)確稱(chēng)量的上述固體基質(zhì)30.9g，加熱待其完全溶解后加入100μL二水鉬酸鈉和五水硫酸銅的單獨(dú)母液，進(jìn)而加入其它所需試劑即可。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該高精密度培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法具有以下特點(diǎn)，即不同批次的基質(zhì)之間無(wú)計(jì)算誤差；由于15種試劑都擴(kuò)大了1000倍，2種試劑擴(kuò)大了10000倍，不同批次的基質(zhì)之間的稱(chēng)量誤差極小，精密度高；理論上，由于固體基質(zhì)每次為1000倍的使用量(以每次1L計(jì)算)，即可以配制1000L的上述配方，液體母液每次僅需要100μL，批次內(nèi)部不會(huì)出現(xiàn)因?yàn)槭褂貌煌瑥S家、不同時(shí)期的試劑而導(dǎo)致的人為誤差；擴(kuò)大后的固體基質(zhì)為每100g密封于一個(gè)塑料容器中，可避免因天氣、溫度、水分等外界因素影響導(dǎo)致出現(xiàn)液體母液常見(jiàn)的沉淀、發(fā)霉等現(xiàn)象，而液體基質(zhì)僅為兩種元素的混合；擴(kuò)大10000倍后精密度高；上述的諸多優(yōu)點(diǎn)都為以該培養(yǎng)基為基質(zhì)開(kāi)展的后續(xù)試驗(yàn)，獲得準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果奠定基礎(chǔ)。