[發明專利]一種高精度改良Nitsch(含固定介質和碳源)培養基質的規模化制作方法

無效

• 申請號: 201510082201.5
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104642116A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 錢家靜
• 申請（專利權）人: 錢家靜
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明公開了一種高精度改良Nitsch(含固定介質和碳源)培養基質的規模化制作方法，屬于植物生物技術領域。更具體地說是一種包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟，以期獲得不同批次和批次之間誤差極小的培養基質、減少試驗誤差的方法。

背景技術

植物組織培養技術或無土栽培技術通常需要配制培養基母液，即配制擴大一定倍數、含有各種類型試劑的液體。然而，由于母液含有不同類型試劑，常常分為大量元素、微量元素、鐵鹽和有機元素四大類，而四大類所擴大的倍數不同，導致藥品使用質量不一致，一則容易出現計算誤差；二則藥品的廠家、質量不一致，即使計算、稱量一致，也會影響試驗結果；三則由于母液為液體狀態，在春夏之交季節，由于氣溫上升以及濕度增大，極其容易導致母液感染細菌、霉菌，導致母液中呈現不同顏色或出現沉淀的現象，浪費了原料；四則會因稱量者對容器刻度的認知(尤其是微量元素)、儀器精密度的不同而出現較大誤差。

鑒于母液配制的上述缺點，用常規的母液配制培養基，常常會出現因稱量者、藥品、季節等因素而導致的試驗結果失敗或無法重復的現象，極大的影響了運用植物組織培養或無土栽培技術開展試驗的進程，打擊了試驗者的信心。

發明內容

一種高精度改良Nitsch(含固定介質和碳源)培養基質的規模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。

根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六個步驟具體操作如下：

①?????準確計算：將改良Nitsch基本培養基所含的15種元素擴大1000倍，即七水硫酸鋅0.05g，鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素和泛酸鈣各0.25g，硼酸0.5g，煙酸1.25g，四水硫酸錳3g，甘氨酸7.5g，檸檬酸鐵10g，七水硫酸鎂125g，磷酸二氫鉀125g，硝酸鉀125g，四水硝酸鈣500g，瓊脂粉5000g，蔗糖30000g；2種元素二水鉬酸鈉和五水硫酸銅擴大10000倍，即各0.25g；

②?????精確稱量：按照①中計算的結果準確稱量，尤其是要用萬分之一天平準確稱量各0.25g的二水鉬酸鈉和五水硫酸銅；

③?????先少后多地混合：按照量的少多進行先后混合，即按照七水硫酸鋅，鹽酸吡哆醇，鹽酸硫胺素，泛酸鈣各，硼酸，煙酸，四水硫酸錳，甘氨酸，檸檬酸鐵，七水硫酸鎂，磷酸二氫鉀，硝酸鉀，四水硝酸鈣，瓊脂粉，蔗糖的順序混合均勻，共計30898.05g；

④?????密封：將混合后的固體基質按照100g每瓶的要求分裝于塑料容器中，并進行密封；

⑤?????單獨母液制備：二水鉬酸鈉和五水硫酸銅各稱量0.25g，溶于1L蒸餾水中，配制成10000倍母液；

⑥?????啟封使用：根據需要，每1L蒸餾水中加入準確稱量的上述固體基質30.9g，加熱待其完全溶解后加入100μL二水鉬酸鈉和五水硫酸銅的單獨母液，進而加入其它所需試劑即可。

本發明的有益效果：該高精密度培養基質的規模化制作方法具有以下特點，即不同批次的基質之間無計算誤差；由于15種試劑都擴大了1000倍，2種試劑擴大了10000倍，不同批次的基質之間的稱量誤差極小，精密度高；理論上，由于固體基質每次為1000倍的使用量(以每次1L計算)，即可以配制1000L的上述配方，液體母液每次僅需要100μL，批次內部不會出現因為使用不同廠家、不同時期的試劑而導致的人為誤差；擴大后的固體基質為每100g密封于一個塑料容器中，可避免因天氣、溫度、水分等外界因素影響導致出現液體母液常見的沉淀、發霉等現象，而液體基質僅為兩種元素的混合。擴大10000倍后精密度高；上述的諸多優點都為以該培養基為基質開展的后續試驗，獲得準確的試驗結果奠定基礎。。

具體實施方式：

下面結合具體實施例對本發明進行進一步的描述。

本實施例中一種高精度改良Nitsch(含固定介質和碳源)(含固定介質和碳源和固定介質)固體培養基質的規模化制作方法，包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。

上述六個步驟具體操作如下：