[發(fā)明專利]一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯(lián)合工序制備麻纖維的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510080793.7
• 申請日: 2015-02-15
• 公開（公告）號: CN104630910A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁若垚;劉國亮;郁崇文;張興群
• 申請（專利權(quán)）人: 東華大學(xué);鹽城工學(xué)院
• 主分類號: D01C1/04
• 分類號: D01C1/04;C12N9/02;C12R1/74
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 31233
• 代理人: 黃志達(dá)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物紡織技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯(lián)合工序制備麻纖維的方法。

背景技術(shù)

麻是紡織原料之一，其品種主要有亞麻、苧麻、大麻、紅麻、黃麻、羅布麻、劍麻、蕉麻、蕁麻和苘麻等。苧麻是我國特有的麻類資源，被稱為“中國草”，我國是世界上的主要苧麻生產(chǎn)國，苧麻產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量90％以上；亞麻纖維俗稱“纖維皇后”，是世界上最古老的紡織纖維，制成的織物用途很廣泛。大麻纖維也是人類最早利用的紡織纖維之一，我國大麻產(chǎn)量居世界首位。作為綠色生態(tài)纖維，麻纖維具有吸濕、透氣、抑菌、防霉、抗紫外線、無靜電等優(yōu)良性能，所制成的紡織品具有透氣涼爽、抑菌防腐等特性。在國家節(jié)能減排政策和消費者回歸自然、追求綠色的消費觀念推動下，麻類纖維綠色加工技術(shù)已經(jīng)成為紡織領(lǐng)域的研究熱點。

麻纖維種類繁多，它們由不同比重的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、果膠和雜質(zhì)組成，紡織加工中，必須經(jīng)過“脫膠”，亞麻脫膠又稱亞麻粗紗煮煉，即去除果膠、半纖維素和木質(zhì)素等非纖維素物質(zhì)(統(tǒng)稱為膠質(zhì))，才能獲得用于輕紡的纖維，實現(xiàn)其使用價值。常用的微生物脫膠是利用微生物以麻纖維中的膠質(zhì)為其碳素、氮素營養(yǎng)來源的特性，將麻纖維中的果膠、半纖維素、木質(zhì)素等物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為簡單的低分子物質(zhì)，從中得到本身生命活動所需的營養(yǎng)物質(zhì)和熱能，從而完成麻纖維的脫膠過程。通過采集菌樣，再進行富集培養(yǎng)，分離純化，在適宜的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下可以培養(yǎng)出健壯而又有較強生命力的菌種，然后接種到需脫膠的原麻上進行脫膠。

工業(yè)中普遍使用的化學(xué)脫膠方法需經(jīng)4-6次水洗，生產(chǎn)一噸精干麻通常需要500-700噸水，而且生產(chǎn)中工作不連續(xù)、勞動強度大、脫膠工藝時間長，能耗高，脫膠質(zhì)量影響織物外觀。更不能適應(yīng)高檔、高支織物需要。為了去除更多膠質(zhì)，提高脫膠效率，方便后道工序加工，工業(yè)選擇了化學(xué)方法和細(xì)菌聯(lián)合對亞麻煮練，此法聯(lián)合處理麻是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)纖維的加工工藝，其過程中的菌種選擇和加雙氧水的工藝是脫膠的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯(lián)合工序制備麻纖維的方法，該方法采用的菌株生長周期短，菌種不易被污染，處理成本低，脫膠條件溫和；脫膠方法流程簡單，時間縮短，能耗減少，排污量減少，有利環(huán)境保護。

本發(fā)明的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯(lián)合工序制備麻纖維的方法，包括：

(1)將熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)，添加凍存緩沖液；經(jīng)由PDA斜面培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接入裝有基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的三角瓶中，接入所得的菌一環(huán)，在搖床中25～30℃恒溫震蕩培養(yǎng)3～4d后，培養(yǎng)基接種入亞麻發(fā)酵培養(yǎng)基(亞麻發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為？)，搖瓶培養(yǎng)得到發(fā)酵菌液，發(fā)酵菌液經(jīng)過濾得到菌絲體，菌絲體用無菌水洗凈打散，隨后收集于無菌水中制成菌絲懸浮液，保存?zhèn)溆茫?/p>

(2)在基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基中分別加入1～2％w/v的天然底物和不同濃度的CuSO₄·5H₂O作為產(chǎn)酶培養(yǎng)基，在三角瓶中裝入產(chǎn)酶培養(yǎng)基，接入上述菌絲懸浮液，在搖床中25～30℃恒溫震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中定時提取發(fā)酵液，離心后取上清液即為粗酶液；

(3)將滅菌后的麻類原料與上述粗酶液和雙氧水的混合液按質(zhì)量體積比1:10～30混合，調(diào)節(jié)pH值，然后放在搖床中進行處理，最后加入氫氧化鈉，并升高溫度進行脫膠，除去脫膠液，沖洗，當(dāng)pH值為自然時，停止沖洗，完成脫膠。

所述步驟(1)中的熱帶假絲酵母DK2菌株的ITS序列如SEQ?ID?NO:1所示。

根據(jù)ITS測序Blast及聚類分析結(jié)果，該菌與熱帶假絲酵母菌相似性為99％，結(jié)合生理生化試驗結(jié)果和鏡檢分析，命名此菌株為熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)DK2菌株。ITS測序中，所采用的正向引物為：ITS1(5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)、反向引物為ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)，均為國際通用引物，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

本發(fā)明所采用的熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)DK2菌株，保藏單位名稱：CGMCC中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，保藏號為CGMCC?NO.10186，保藏日期為2014年12月15日。建議分類命名為：熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)。