[發明專利]一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法

有效

• 申請號: 201510080793.7
• 申請日: 2015-02-15
• 公開（公告）號: CN104630910A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發明（設計）人: 丁若垚;劉國亮;郁崇文;張興群
• 申請（專利權）人: 東華大學;鹽城工學院
• 主分類號: D01C1/04
• 分類號: D01C1/04;C12N9/02;C12R1/74
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

1.一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，包括：

(1)將熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養基培養，添加凍存緩沖液；經由PDA斜面培養基轉接入裝有基礎液體培養基的三角瓶中，接入所得的菌一環，在搖床中25～30℃恒溫震蕩培養3～4d后，培養基接種入亞麻發酵培養基，搖瓶培養得到發酵菌液，發酵菌液經過濾得到菌絲體，菌絲體用無菌水洗凈打散，隨后收集于無菌水中制成菌絲懸浮液，保存備用；

(2)在基礎液體培養基中分別加入1～2％w/v的天然底物和不同濃度的CuSO₄·5H₂O作為產酶培養基，在三角瓶中裝入產酶培養基，接入上述菌絲懸浮液，在搖床中25～30℃恒溫震蕩培養，培養過程中定時提取發酵液，離心后取上清液即為粗酶液；

(3)將滅菌后的麻類原料與上述粗酶液和雙氧水的混合液按質量體積比1:10～30混合，調節pH值，然后放在搖床中進行處理，最后加入氫氧化鈉，并升高溫度進行脫膠，除去脫膠液，沖洗，當pH值為自然時，停止沖洗，完成脫膠。

2.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的熱帶假絲酵母DK2菌株的ITS序列如SEQ?ID?NO:1所示。

3.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的凍存緩沖液每100ml的配方為：磷酸二氫鉀0.1g，磷酸氫二鉀0.02g，檸檬酸鈉0.06g，七水合硫酸鎂0.03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。

4.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的基礎液體培養基的組成為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蒸餾水1000mL，pH自然；亞麻發酵培養基的組成為：每1000ml培養基包括亞麻皮200g，麩皮50g，麥芽汁50ml和水950ml。

5.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的保存溫度為40℃。

6.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的天然底物為茶葉、稻草、麥草、花生殼、豆粕、蔗渣、桔皮、玉米桿或麥鼓；CuSO₄·5H₂O的濃度范圍為0-4mM。

7.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的產酶培養基的組成為：NaNO₃2.5g，KH₂PO₄1g，CaCl₂·6H₂O0.1g，MgSO₄0.3g，NaCl?0.1g，FeCl₃0.01g，油菜秸稈粉0.5g，蒸餾水1000mL，pH用稀鹽酸調至6.0-7.0。

8.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(3)中的麻類原料為亞麻、苧麻、黃麻、紅麻或竹的原莖、纖維、紗線或織物。

9.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(3)中的粗酶液和雙氧水之間的體積比為1:10；所述調節pH值至4.0-7.0。

10.根據權利要求1所述的一種熱帶假絲酵母DK2菌株與雙氧水聯合工序制備麻纖維的方法，其特征在于：所述步驟(3)中的搖床處理工藝參數為：溫度10-60℃，轉速10-300rpm，處理時間10min-5d；脫膠工藝參數為：脫膠時間10min-24h，脫膠溫度50-80℃，升溫速度0.1-10℃/min，氫氧化鈉用量為麻類原料質量的0.5％-30％。