[發(fā)明專利]一種多角體蛋白包裹型植酸酶

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510079969.7
• 申請日: 2015-02-13
• 公開（公告）號: CN104560934A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 袁林;郭建軍;曾靜;靳亮;邱小忠;楊一兵;魏國汶
• 申請（專利權(quán)）人: 江西省科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N11/04
• 分類號: C12N11/04;C12N9/16;C12N15/866
• 代理公司: 深圳市明日今典知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44343
• 代理人: 羅志強

1.一種多角體蛋白包裹型植酸酶，其特征在于，由植酸酶aPPA分子和包裹層組成，所述包裹層為昆蟲質(zhì)型多角體蛋白，所述植酸酶aPPA分子以固態(tài)分子的形式被包裹于所述昆蟲質(zhì)型多角體蛋白內(nèi)；所述多角體蛋白包裹型植酸酶的顆粒大小為0.1～1μm，植酸酶蛋白濃度占比為10％～70％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多角體蛋白包裹型植酸酶，其特征在于，所述多角體蛋白包裹型植酸酶是通過如下方法制成，具體步驟如下：

A、利用病毒基因組所展現(xiàn)的密碼子偏倚性，選取植酸酶的密碼子，合成植酸酶aPPA基因，所述植酸酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

B、將步驟A的所述植酸酶aPPA基因構(gòu)建到pFastBacTMDual載體的p10啟動子下，并在所述植酸酶aPPA基因前引入SP引導(dǎo)基因，構(gòu)建含有植酸酶aPPA基因及多角體基因的重組桿狀病毒載體，所述SP引導(dǎo)基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述多角體基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；

C、將步驟B中的所述重組桿狀病毒載體與桿狀病毒骨架重組，獲得重組桿狀病毒；

D、用步驟C中的所述重組桿狀病毒感染昆蟲細(xì)胞，分離純化多角體顆粒，即得到多角體蛋白包裹型植酸酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多角體蛋白包裹型植酸酶，其特征在于，步驟D中所述昆蟲細(xì)胞為Sf9昆蟲細(xì)胞或Sf21昆蟲細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的多角體蛋白包裹型植酸酶，其特征在于，所述多角體蛋白包裹型植酸酶中植酸酶蛋白濃度占比為45％～55％。