[發(fā)明專利]異源和同源纖維素酶表達(dá)體系

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510078857.X
• 申請日: 2008-06-05
• 公開（公告）號: CN104726350A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: B·S·鮑爾;E·A·拉雷納斯
• 申請（專利權(quán)）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: C12N1/15
• 分類號: C12N1/15;C12N15/56;C12N9/42;C12R1/885
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 凌立;黃革生

1.絲狀真菌，其包含：

編碼第一異源多肽的第一多核苷酸，

編碼第二異源多肽的第二多核苷酸，和

編碼同源多肽的第三多核苷酸，

其中所述絲狀真菌能夠表達(dá)所述第一異源多肽和第二異源多肽與同源多肽，并且其中所述第一異源多肽和第二異源多肽與同源多肽形成功能性混合物。

2.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一多核苷酸與第一啟動(dòng)子有效連接。

3.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第二多核苷酸與第三多核苷酸融合，并且其中所述第二和第三多核苷酸與第二啟動(dòng)子有效連接。

4.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一多核苷酸與編碼同源多肽的基因的固有啟動(dòng)子有效連接。

5.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第二多核苷酸與第三多核苷酸融合，并且其中所述第三多核苷酸與編碼同源多肽的基因的啟動(dòng)子有效連接。

6.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第二多核苷酸與第三多核苷酸融合以形成編碼融合蛋白的多核苷酸，其中所述融合蛋白包含通過接頭隔開的第二異源多肽和同源多肽。

7.權(quán)利要求6的絲狀真菌，其中所述融合蛋白還包含切割位點(diǎn)。

8.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其還包含編碼選擇性標(biāo)記的第四多核苷酸。

9.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其還包含編碼第三異源多肽的第四多核苷酸，其中所述絲狀真菌能夠表達(dá)第三異源多肽。

10.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽是經(jīng)修飾的同源多肽。

11.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其還包含編碼第三異源多肽的第四多核苷酸，其中所述第一異源多肽和第二異源多肽是經(jīng)修飾的同源多肽。

12.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽、第二異源多肽或同源多肽是酶。

13.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽、第二異源多肽或同源多肽是纖維素酶。

14.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述功能性混合物是纖維素酶的混合物。

15.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽、第二異源多肽或同源多肽是選自以下的纖維素酶：外切纖維二糖水解酶、內(nèi)切葡聚糖酶和β-葡糖苷酶。

16.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽是外切纖維二糖水解酶，且第二異源多肽是內(nèi)切葡聚糖酶。

17.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽是選自GH家族5、6、7、9和48的外切纖維二糖水解酶，并且其中所述第二異源多肽是選自GH家族5、6、7、8、9、12、17、31、44、45、48、51、61、64、74和81的內(nèi)切葡聚糖酶。

18.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述第一異源多肽是外切纖維二糖水解酶，第二異源多肽是內(nèi)切葡聚糖酶，并且其中所述同源多肽是外切纖維二糖水解酶。

19.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中第一異源多肽是第一外切纖維二糖水解酶，第二異源多肽是內(nèi)切葡聚糖酶，同源多肽是第二外切纖維二糖水解酶，且其中第一外切纖維二糖水解酶和第二外切纖維二糖水解酶對應(yīng)于相同的纖維二糖水解酶成員。

20.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述絲狀真菌選自曲霉屬、枝頂孢屬、短梗霉屬、白僵菌屬、頭孢霉屬、擬蠟菌屬、毛殼菌屬、擬青霉、Chrysosporium、麥角菌屬、旋孢腔菌屬、隱球酵母屬、黑蛋巢菌屬、內(nèi)座殼屬、鐮孢屬、Gilocladium、腐質(zhì)霉屬、Magnaporthe、毀絲霉屬、漆斑菌屬、毛霉屬、脈孢菌屬(Neurospora)、Phanerochaete、柄孢殼屬、擬青霉屬、青霉屬、Pyricularia、根毛霉屬、根霉屬、裂褶菌屬、殼多孢屬、踝節(jié)菌屬、木霉屬、Thermomyces、嗜熱子囊菌屬、梭孢殼屬、Tolypocladium、發(fā)癬菌屬、栓菌(Trametes)和側(cè)耳(Pleurotus)。

21.權(quán)利要求1的絲狀真菌，其中所述絲狀真菌是里氏木霉，并且其中第一異源多肽是灰腐質(zhì)霉CBHI，第二異源多肽是解纖維熱酸菌內(nèi)切葡聚糖酶1，并且其中同源多肽是里氏木霉CBHI。