[發明專利]一種快速鑒定茶褐素的方法

有效

• 申請號: 201510074729.8
• 申請日: 2015-02-12
• 公開（公告）號: CN104614335A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 張進
• 申請（專利權）人: 張進
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N27/447
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 曾少麗

技術領域

本發明涉及化學鑒定領域，特別是一種快速鑒定茶褐素的方法。

背景技術

現有的茶褐素(茶色素)鑒定方法分為定性和定量兩種，傳統的紫外吸收定性方法采用普通分光光度計，茶褐素吸收峰為273nm±20nm，傳統的基于標準曲線的比色法定量需要標準品，鑒于茶褐素(茶色素)是一個混合多聚物，所以沒有真正意義的標準品，并且操作時間比較長(1小時以上)，每次的標準曲線都需要重新做，用此方法測定的值誤差比較大，甚至會出現含量超過100％的情況。

現在新出現了一種采用高效液相色譜或質譜或液-質聯用的方法進行茶褐素的檢測方法，所得數據精確，但也具有一些缺陷，如機器貴，速度慢，對操作人員技能要求高，高效液相色譜太精密，所測結果差異很大。

發明內容

為了解決如上技術問題，本發明提供了一種快速鑒定茶褐素的方法，該方法具有檢測快速準確，受人為因素影響小，工作量小的特點。

本發明的一種快速鑒定茶褐素的方法，包括如下步驟：

1)定性檢測：配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型；

2)定量檢測：配制已知濃度茶褐素溶液，使用毛細管電泳儀檢測茶褐素溶液的吸收峰，并通過吸收峰峰面積或峰高繪制標準曲線及公式；然后檢測待測茶褐素溶液，對照標準曲線計算得到待測茶褐素含量。

進一步的，所述步驟1)具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5μL茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現特征吸收峰及確定的峰型。

進一步的，所述步驟2)具體為配制5-20個不同濃度且濃度為0.5-8g/L的含量為90％的茶褐素溶液后，每個濃度的溶液中取2-10ml茶褐素溶液在毛細管電泳儀上檢測茶褐素的吸收峰，通過吸收峰的峰面積或峰高，計算茶褐素含量，并擬合濃度-峰面積標準曲線：

y＝0.000003679～0.000011037x±0.093063315；

或濃度-峰高標準曲線：

y＝0.000126115～0.000378345x±0.039633517；

其中毛細管電泳儀的檢測條件為：緩沖溶液為硼砂，毛細管長度為30-60cm，電泳時間為700-1200s，進樣壓力為0.5-2kpa，沖洗壓力為20-50kpa，紫外檢測器檢測波長273nm；

以同樣電泳條件將濃度為0.5-8g/L的待測茶褐素樣品進行毛細管電泳獲得峰面積或峰高，根據濃度-峰面積或濃度-峰高標準曲線計算出相對濃度，最終得到待測茶褐素樣品的含量。

上述快速鑒定茶褐素的方法由定性檢測先檢測溶液中是否含有茶褐素，再對含有茶褐素的溶液進行定量檢測，通過計算得到茶褐素的相對濃度，進而得到該茶褐素樣品的含量；該定性檢測和定量檢測相結合對茶褐素溶液進行檢測的方法可在30min內精確測量茶褐素含量，誤差僅為5％-10％，大大低于以往對茶褐素的檢測方法的誤差率。

進一步的，一種快速鑒定茶褐素的方法，該方法為：配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型。

進一步的，所述方法具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5μL茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現特征吸收峰及確定的峰型。

當僅需對溶液進行茶褐素的定性檢測，不需定量檢測時，可采用本發明的上述方法，該方法為定性檢測，該定性檢測由超微量紫外分光光度計進行檢測，測得的茶褐素特征峰在273nm±2nm處并且全波長峰型獨特。通過該方法對不確定是否含茶褐素的溶液進行檢測，若在273nm±2nm處出現特征峰，則說明該溶液中含有茶褐素，若無該特征峰，則說明該溶液中不含茶褐素。如果峰型圖形狀不一致，說明樣品中可能含有其他物質。

上述快速鑒定茶褐素的方法僅為定性檢測，可在5min內判斷溶液內是否含有茶褐素，檢測時間短，檢測結果準確。

綜上，本發明的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有：檢測結果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差小；檢測工作量小；檢測步驟標準化。

附圖說明

圖1為實施例1中超微量紫外分光光度計吸光度峰型圖；

圖2為實施例1中毛細管電泳儀檢測的電泳圖；

圖3為實施例2中超微量紫外分光光度計吸光度峰型圖；