[發明專利]rT3化學發光免疫檢測試劑盒及其檢測方法和應用

在審

• 申請號: 201510072904.X
• 申請日: 2015-02-10
• 公開（公告）號: CN104730257A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發明（設計）人: 饒微;徐紅;梁詠秋;羅凱;楊雅麗;李婷華;袁錦云
• 申請（專利權）人: 深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/78
• 分類號: G01N33/78;G01N21/63
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 生啟

技術領域

本發明涉及體外診斷檢測技術領域，特別是涉及一種rT3(反三碘甲狀腺原氨酸)化學發光免疫檢測試劑盒及其檢測方法和應用。

背景技術

反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)又稱3，3＇,5＇-三碘甲腺原氨酸，是正常人血清中存在的一種甲狀腺激素，是T4(甲狀腺素)在肝、腎、垂體及心肌等組織中，經5-脫碘酶脫去酪氨酸環上的一個碘而生成的。rT3在體內降解速度較快，其半壽期為30-60分鐘。它在血液中含量甚微，生物活性很低，但在不同的生理及病理狀況下，血清含量有顯著區別，因此，測定血清中rT3水平在臨床上仍有一定意義。例如：妊娠時，臍血及羊水rT3含量較高，能反映胎兒甲狀腺功能狀態。總體來說，血清中rT3濃度男女間無差異，從兒童到40歲之間隨年齡增長呈下降趨勢，而40歲以后又隨年齡增長呈上升趨勢。

具體來說，當rT3增高或降低，有助于以下幾種情況的判斷：

A，甲狀腺功能亢進或減退癥：甲亢時rT3升高，而且比T3，T4靈敏。當用抗甲狀腺藥物治療時，T3降低較快，而rT3下降緩慢，當T3和rT3都正常，表示用藥適當；若rT3和T4均低于正常，則表示用藥過量。rT3的降低對于輕型或亞臨床型甲狀腺功能減退的判斷有非常重要的意義。

B，甲狀腺疾病：急性心肌梗塞，肝硬變、糖尿病、尿素癥、腦血管病、胃癌等類疾病還可出現T3下降，故顯示出T3/rT3比值降低。

C.替代治療的觀察：甲狀腺機能減退癥服用甲狀腺素替代治療后，rT3、T3均升高提示用量過大，而甲狀腺功能減退癥在使用抗甲亢藥物后出現rT3下降，則提示藥物用量過大，故rT3測定可用于監測用藥。

D.藥物引起的高rT3現象：使用乙胺碘呋酮、糖皮質激素、丙基硫氧嘧啶、心得胺等藥物可出現高rT3現象，故rT3還可用于監測上述藥物的使用。

目前，臨床上測定血清反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)的方法主要有放射性免疫法、酶聯免疫法等，而放射性免疫法及酶聯免疫法存在諸多不足。如：傳統的放射性免疫法或酶聯免疫法方法檢測時間長，同時主要依靠純手工加樣等系列繁瑣操作，效率低，容易導致實驗結果誤差大；由于酶促反應不夠徹底，且易受外部干擾因素影響，如溫度、時間及材料濃度影響，因此檢測時特異性低，靈敏度差，檢測范圍窄。并且，放射性免疫法還存在放射性污染、標記物半衰期短、對操作者具有放射性損傷等缺陷。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種rT3化學發光免疫檢測試劑盒，該化學發光免疫檢測試劑盒是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，具有靈敏度高，特異性好和檢測范圍寬的優點。

為實現上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種rT3化學發光免疫檢測試劑盒，包括以下組分：

1)標記物體系：包括直接連接或間接連接標記示蹤物的反三碘甲狀腺原氨酸抗原或抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體；

2)磁性微球體系：包括相應的直接連接或間接連接抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體或反三碘甲狀腺原氨酸抗原的磁性微球。

并且，當標記物體系包括直接連接或間接連接標記示蹤物的反三碘甲狀腺原氨酸抗原，則磁性微球體系包括直接連接或間接連接抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體的磁性微球；當標記物體系包括直接連接或間接連接標記示蹤物的抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體，則磁性微球體系包括直接連接或間接連接反三碘甲狀腺原氨酸抗原的磁性微球。

上述“直接連接”為直接結合的連接，上述“間接連接”為通過生物素和鏈霉親和素，或異硫氰酸熒光素和抗異硫氰酸熒光素抗體等能夠相互結合的搭橋物以間接結合的方式連接。

本發明提供了一種rT3化學發光免疫檢測試劑盒，利用化學發光免疫的方法來檢測rT3，具有靈敏度高，特異性好和檢測范圍寬的優點，并且，本發明中的試劑盒，以磁性微球作為檢測中的固相體系，既能在與待測物反應時均勻的懸浮于反應體系中，與待測物更好的結合，又能在分離時外加磁場即可方便的實現分離，具有操作方便的特點。更為重要的是，該檢測試劑盒能與常規技術中的化學發光分析儀配合使用，實現全自動化檢測，避免了人為因素可能導致的實驗誤差，并提高了分析效率。

在其中一個實施例中，所述2)磁性微球體系中，所述間接連接抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體的磁性微球由生物素標記的抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體，和鏈霉親和素包被的磁性微球組成；或所述間接連接抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體的磁性微球由異硫氰酸熒光素標記的抗反三碘甲狀腺原氨酸抗體，和抗異硫氰酸熒光素抗體包被的磁性微球組成。