[發(fā)明專利]一種腫瘤間質(zhì)pH敏感型靶向樹狀聚合物及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510071775.2
• 申請日: 2015-02-11
• 公開（公告）號: CN104623685B
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳正紅;欽佳怡;單其磊;祁小樂;秦曉雪;楊蓉;李文艷
• 申請（專利權(quán)）人: 中國藥科大學(xué)
• 主分類號: A61K47/61
• 分類號: A61K47/61;A61K47/59;A61K31/704;A61P35/00;C08G83/00
• 代理公司: 江蘇永衡昭輝律師事務(wù)所32250
• 代理人: 王斌

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種腫瘤間質(zhì)pH敏感型靶向樹狀聚合物及其制備方法。

背景技術(shù)

功能性高分子材料已成為腫瘤靶向給藥系統(tǒng)研究的熱點(diǎn)。近幾年來，大量功能材料被用于制備腫瘤靶向載藥遞送系統(tǒng)，包括各類脂質(zhì)體、膠束和微乳等。然而這些靶向載藥遞送系統(tǒng)仍存在入胞能力差，對難溶性藥物增溶能力有限等諸多弊端。陽離子載體聚酰胺-胺（Polyamidoamine，PAMAM）樹狀聚合物大分子是一種新型高度分支的功能性材料，具有水溶性高、末端官能團(tuán)可修飾、具有較大的內(nèi)部疏水空腔等優(yōu)勢。由于PAMAM粒徑小（5～10 nm），易于被腫瘤組織的血管截留，具有被動(dòng)靶向的特性。同時(shí)，PAMAM荷正電，易與荷負(fù)電的腫瘤細(xì)胞膜結(jié)合，具備良好的入胞能力，可介導(dǎo)藥物在腫瘤部位高效入胞以發(fā)揮療效，被認(rèn)為是最有前景的腫瘤靶向納米遞藥系統(tǒng)之一。然而，未經(jīng)修飾的PAMAM表面富集正電荷，會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞被破壞，帶來嚴(yán)重的毒副作用，且易被巨噬細(xì)胞快速識別并吞噬，使得其應(yīng)用受到大大限制。因此，很多研究致力于對樹狀聚合物表面進(jìn)行修飾以掩蓋其正電荷，其中接枝聚乙二醇（Polyethylene glycol，PEG）是主要的修飾手段，但該方法在降低載體毒副作用的同時(shí)也降低了其入胞能力。為了克服以上矛盾，尋找一種新的可靈活響應(yīng)的修飾材料顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種腫瘤間質(zhì)pH敏感型靶向樹狀聚合物及其制備方法，該樹狀聚合物不僅可實(shí)現(xiàn)藥物至腫瘤組織的靶向遞送，降低腫瘤靶向載藥遞送系統(tǒng)對正常組織的毒副作用，同時(shí)還能促進(jìn)載體跨腫瘤細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)，增加藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的累積而提高療效。

一種腫瘤間質(zhì)pH敏感型靶向樹狀聚合物，通式為：CMCS-PAMAM-X，其中，CMCS為羧甲基殼聚糖，PAMAM為5代的陽離子聚酰胺-胺樹狀大分子，X為阿霉素，所述樹狀聚合物的粒徑為50～200 nm。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述羧甲基殼聚糖分子量為2～25 kDa，羧化度為50%～70%。

上述腫瘤間質(zhì)pH敏感型靶向樹狀聚合物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，將0.5~10g殼聚糖溶于8~150 mL 50%wt NaOH溶液中，堿化12~24 h后抽濾，所得固體Ⅰ加至2.5倍質(zhì)量的氯乙酸中，室溫下反應(yīng)6~24 h后抽濾，所得固體Ⅱ加25~500 mL水溶解，用2 M HCl調(diào)節(jié)溶液pH至7.0，將溶液離心，加100~1000 mL無水乙醇至上清液中，抽濾，用無水乙醇洗滌所得固體Ⅲ，于30～60℃烘干固體Ⅲ，加10～30 mL水溶解，用分子量為500～3500的透析袋在水中透析除雜，凍干48 ~ 96 h，得CMCS；

步驟2，稱取5 ~ 100 mg PAMAM溶于1.5 ~ 15 mL超純水中，得PAMAM水溶液，稱取1 ~ 20倍PAMAM摩爾量的鹽酸阿霉素溶于300 ~ 3000 μL無水甲醇中，再加入5 ~ 50 μL三乙胺，得阿霉素甲醇溶液，將該溶液滴加到上述PAMAM水溶液中，500 ~ 2000 rpm攪拌避光反應(yīng)12 ~ 24 h，將反應(yīng)液離心，取上清液，冷凍干燥得載藥PAMAM內(nèi)核；

步驟3，將步驟2所得5 ~ 100 mg載藥PAMAM內(nèi)核溶于1 ~ 10 mL超純水中，取100 μL加至1 ~ 10 mL 1mg/mL ~ 10mg/mL的CMCS PBS溶液中，500 ~ 2000 rpm攪拌反應(yīng)10 ~ 30 min，得靶向樹狀聚合物，其中PBS溶液pH為7.4，PO₄^3-濃度為10 mM。

在正常生理環(huán)境（pH 7.4）中，CMCS荷負(fù)電，通過靜電作用吸附在PAMAM樹狀聚合物大分子表面，從而降低陽離子聚合物PAMAM的毒性，并防止其被巨噬細(xì)胞迅速清除。一旦到達(dá)腫瘤間質(zhì)環(huán)境（pH 6.5）中，外層CMCS發(fā)生電荷翻轉(zhuǎn)，荷正電，兩者電性相斥，CMCS迅速與內(nèi)核分離，隨后，PAMAM恢復(fù)高的正電位，促進(jìn)PAMAM粒子內(nèi)化至腫瘤細(xì)胞，增強(qiáng)阿霉素的抗腫瘤作用。

本發(fā)明創(chuàng)造性的通過制備羧化度為50～70%的羧甲基殼聚糖，其與PAMAM結(jié)合，能夠選擇性地在腫瘤間質(zhì)的pH環(huán)境下與PAMAM脫離，從而起到靶向選擇的特性。

本發(fā)明不僅可實(shí)現(xiàn)藥物至腫瘤組織的靶向遞送，降低腫瘤靶向載藥遞送系統(tǒng)對正常組織的毒副作用，同時(shí)還能促進(jìn)載體跨腫瘤細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)，增加藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的累積而提高療效。

附圖說明