[發明專利]同時測定血漿中脂蛋白磷脂酶A2和C反應蛋白的層析法快速檢測卡及試劑盒

在審

• 申請號: 201510067870.5
• 申請日: 2015-02-09
• 公開（公告）號: CN104614534A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 楊子學
• 申請（專利權）人: 楊子學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 北京天平專利商標代理有限公司 11239
• 代理人: 繆友菊

1.一種同時測定血漿中脂蛋白磷脂酶A2和C反應蛋白的層析法快速檢測卡，包括底襯及從左到右順次相互搭接粘貼在底襯上方的樣品墊、涂覆有膠乳微球標記抗體的試劑墊、包被膜和吸水紙，所述包被膜上在靠近吸水紙的一端劃有一條包被了兔抗鼠IgG單克隆抗體的質控線，所述包被膜上在靠近試劑墊的一端劃有兩條平行的第一檢測線和第二檢測線，其中，靠近試劑墊的第一檢測線上包被有能與待檢抗原Lp-PLA2特異性結合的單克隆抗體，第二檢測線上包被有能與待檢抗原CRP特異結合的單克隆抗體。

2.根據權利要求1所述的快速檢測卡，其特征在于，所述底襯為PVC底板或其他硬質不吸水的材料；所述樣品墊為吸濾紙或濾油紙；所述試劑墊為聚酯膜；所述包被膜為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜。

3.根據權利要求1所述的快速檢測卡，其特征在于，所述的膠乳微球為膠體金顆粒或彩色聚苯乙烯膠乳微球。

4.根據權利要求3所述的快速檢測卡，其特征在于，所述乳膠微球的粒徑為50-75nm。

5.權利要求1所述的快速檢測卡的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)包被膜的制備：用包被緩沖液分別稀釋能與待檢抗原Lp-PLA2特異性結合的抗體、能與待檢抗原CRP特異結合的抗體和兔抗鼠IgG抗體，并將稀釋后的三種抗體分別平行地噴于包被膜上對應的第一檢測線、第二檢測線和質控線，待三種抗體滲入包被膜后分別形成第一檢測線、第二檢測線和質控線；

2)噴涂有膠乳顆粒標記抗體的試劑墊的制備：分別制備連接了Lp-PLA2特異性抗體的膠乳顆粒和連接了CRP特異性抗體的膠乳顆粒，利用這兩種膠乳顆粒的混合物噴涂聚酯膜得到試劑墊；

3)組裝試紙條：在試紙條底襯上順次相互搭接粘貼樣品墊、噴涂有膠乳顆粒標記抗體的聚酯膜、包被膜及吸水紙。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的兩種顆粒具有相同或者不同的顏色。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述抗體與膠乳顆粒的連接方法為物理吸附法或化學偶聯法。

8.一種同時測定血漿中Lp-PLA2和CRP的試劑盒，包括權利要求1所述的層析法快速檢測卡、說明書和外包盒，每單人份金標檢測卡由鋁箔袋密封包裝，每個包裝內另配有一根塑料滴管和一小袋干燥劑。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的檢測靈敏度為：1)Lp-PLA2100ng/mL；2)CRP?100ng/mL。