[發明專利]擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量的測定方法

有效

• 申請號: 201510064283.0
• 申請日: 2015-02-09
• 公開（公告）號: CN104655774A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 陸國壽;韋桂寧;劉吉成;黃建猷;盧文杰;譚曉;黃周峰;何飛;蘇華;曾憲彪
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 羅保康

技術領域

?本發明涉及藥用昆蟲中特定成分含量的測定方法，特別是一種擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量的測定方法。

背景技術

擬黑多刺蟻(Poryrhaehis?vicina?Roger)?為藥用昆蟲擬黑多刺蟻的干燥蟲體。收載于《中華本草》、《中藥大辭典》等，產于廣西，云南等地。其性平、微溫、味咸酸、微腥。擬黑多刺蟻富含鋅、硒、錳、銅、鐵等量元素B1、B2、B6、A、E以及28種人體必須的氨基酸，具有補益肝腎、調理奇經、行氣和血、消腫止痛、抗風濕、鎮靜、消炎、降脂、降糖、抗疲勞、解痛鎮靜、改善睡眠的功能及抑制腫瘤等藥理作用，能改善全身營養狀況，強身益壽。

研究表明，擬黑多刺蟻有降低痛風模型血清尿酸水平及抗炎作用，而擬黑多刺蟻脂溶性成分為其降低高尿酸血癥模型小鼠血清尿酸水平的成分。擬黑多刺蟻中脂溶性成分中的主要成分為棕櫚酸及油酸，棕櫚酸和油酸均為長鏈脂肪酸，揮發性較差，若直接采用氣相色譜法法對其進行含量測定，則有可能氣化不完全，導致測量出現偏差。

目前，尚無擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量測定等方面的研究內容報道。為了促進擬黑多刺蟻的深入開發與利用，急需研發一種靈敏度高、重現性好的擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量的測定方法，為擬黑多刺蟻質量標準提供了研究基礎。

發明內容

本發明的目的是提供一種操作簡便，準確度高，重復性好的擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量的測定方法。

本發明是這樣實現的：

一種擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸含量的測定方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）內標儲備液的制備：

取正十八烷250mg，精密稱定，置于100ml容量瓶中，加60～90℃石油醚溶解并稀釋至100ml，即得內標儲備液。

（2）對照品溶液的制備：

A）精密稱取對照品棕櫚酸甲酯100mg、油酸甲酯100mg，置于同一25ml容量瓶中，用60～90℃石油醚溶解并稀釋至25ml，搖勻，即得對照品儲備液。

B）精密量取對照品儲備液2ml，置于25ml容量瓶中，用60～90℃石油醚溶解并稀釋至25ml，搖勻，即得對照品溶液。

（3）供試品溶液的制備：

C）取擬黑多刺蟻樣品適量，研碎，精密稱取樣品1g，置于100ml塞錐形瓶中，加入60～90℃石油醚10ml，搖勻，置于90℃水浴中回流60min，然后放置冷卻。

D）用60～90℃石油醚補足水浴回流中減失的重量，然后濾過，取2ml濾液至容量為10ml具塞試管中，加入含有1mol/L氫氧化鉀的甲醇溶液2ml，在50℃水浴中震蕩加熱15min，取出冷卻，加入超純水3ml，然后將濾液放入離心機進行離心，取上清液，即得供試品儲備液；

E）精密量取內標儲備液、供試品儲備液各0.5ml置于同一5ml容量瓶中，加60～90℃石油醚稀釋至5ml，搖勻，即得供試品溶液。

（4）用氣相色譜儀、檢測器及色譜檢測軟件配套使用，精密吸取1μL供試品溶液和對照品溶液分別注入氣相色譜儀中，測定棕櫚酸和油酸的色譜分析圖，即得擬黑多刺蟻中棕櫚酸和油酸的含量。

（5）設定色譜測定條件為：色譜柱為Rtx^R-5毛細管色譜柱，色譜柱規格為30m×0.32mm×0.25μm；柱溫采用程序升溫方式，以15oC/min的方式從80℃升溫到220℃后保持5分鐘；柱流量為2.0?ml/min；載氣為高純氦氣；進樣口溫度230?°C；進樣量1μL，分流比10:1。

F）線性關系的測定：精密吸取對照品儲備液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml于10ml容量瓶中，加入內標儲備液1.0ml，用石油醚稀釋至10ml，搖勻；按步驟（5）的色譜條件下測定，以對照品與內標物的峰面積比（A_對照品?/A_內標）為縱坐標，以對照品與內標物濃度比（C_對照品/C_內標）為橫坐標，繪制標準曲線；棕櫚酸甲酯的回歸方程為Y=0.9808X-0.1563?(γ=0.9994）；油酸甲酯的回歸方程為Y=1.1033X＋0.1467（γ=0.9994）。結果顯示，棕櫚酸甲酯、油酸甲酯分別在0.0399~1.597μg、0.0394～1.576μg范圍內線性良好。