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[發(fā)明專利]抗稻瘟病基因Pi9的特異性CAPS標(biāo)記Pi9caps及其應(yīng)用在審

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201510062377.4 申請日: 2015-02-05
公開(公告)號: CN104630364A 公開(公告)日: 2015-05-20
發(fā)明(設(shè)計)人: 朱立煌;呂啟明;黃志遠(yuǎn);盤毅;唐麗;李曉兵;周壯志;辛業(yè)蕓;趙炳然;符習(xí)勤 申請(專利權(quán))人: 中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所;湖南雜交水稻研究中心
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 代理人: 關(guān)暢;陳曉慶
地址: 100101 北*** 國省代碼: 北京;11
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 稻瘟病 基因 pi9 特異性 caps 標(biāo)記 pi9caps 及其 應(yīng)用
【權(quán)利要求書】:

1.一種鑒定或輔助鑒定水稻是否含有抗稻瘟病基因Pi9和/或是否具有稻瘟病抗性的方法,包括如下步驟:檢測待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸,根據(jù)水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸的種類進(jìn)行鑒定:如果待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸含T,則待測水稻為含有抗稻瘟病基因Pi9的水稻或候選為含有抗稻瘟病基因Pi9的水稻和/或具有稻瘟病抗性的水稻,如果待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸不含T,則待測水稻為不含有抗稻瘟病基因Pi9的水稻或候選為不含有抗稻瘟病基因Pi9的水稻。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于:所述檢測待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸的方法如下:以待測水稻的基因組DNA為模板,以稻瘟病抗性基因Pi9的分子標(biāo)記引物為引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,該P(yáng)CR擴(kuò)增產(chǎn)物為所述稻瘟病抗性基因Pi9的分子標(biāo)記;用限制性核酸內(nèi)切酶XbaI酶切所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,如果所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物能被酶切產(chǎn)生兩個DNA片段,則待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸含T,如果所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物不能被酶切,則待測水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40804位核苷酸不含T;

所述引物為能擴(kuò)增所述稻瘟病抗性基因Pi9的分子標(biāo)記的引物,所述稻瘟病抗性基因Pi9的分子標(biāo)記的核苷酸序列為如下A所示的序列:

A、位于水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第39933位至第41277位核苷酸所示的序列內(nèi)并含有第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40802位至第40807位核苷酸的序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于:所述A所示的序列為位于水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40205位至第41006位核苷酸所示的序列;

所述引物為SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子,所述兩個DNA片段分別為長度為599bp的DNA片段和203bp的DNA片段。

4.擴(kuò)增如下A所示的序列的引物:

A、位于水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第39933位至第41277位核苷酸所示的序列內(nèi)并含有第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40802位至第40807位核苷酸的序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的引物,其特征在于:所述A所示的序列為位于水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40205位至第41006位核苷酸所示的序列;

所述引物為SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子。

6.DNA片段,選自水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第39933位至第41277位核苷酸所示的序列內(nèi)并含有第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40802位至第40807位核苷酸的序列。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的DNA片段,其特征在于:所述DNA片段的核苷酸序列為水稻第6號染色體中75-1-127BAC12.1序列或其同源序列自5’末端起第40205位至第41006位核苷酸所示的序列。

8.一種鑒定或輔助鑒定水稻是否含有抗稻瘟病基因Pi9和/或是否具有稻瘟病抗性的試劑盒,該試劑盒包含權(quán)利要求4或5所述的引物。

9.權(quán)利要求4或5所述的引物、權(quán)利要求6或7所述的DNA片段或權(quán)利要求8所述的試劑盒在鑒定或輔助鑒定水稻是否含有抗稻瘟病基因Pi9和/或是否具有稻瘟病抗性中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1-3任一所述的方法、權(quán)利要求4或5所述的引物、權(quán)利要求6或7所述的DNA片段或權(quán)利要求8所述的試劑盒在水稻育種中的應(yīng)用。

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