[發明專利]一種缺失sfp基因的生防菌及其發酵工藝和應用

有效

• 申請號: 201510061973.0
• 申請日: 2015-02-06
• 公開（公告）號: CN104673716B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 繆衛國;靳鵬飛;劉文波;鄭服叢;王皓楠
• 申請（專利權）人: 海南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/00;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司44218
• 代理人: 楊建新

1.一種缺失sfp基因的生防菌，其特征在于，為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)HAB-2，保藏編號為：CCTCC M 2015070。

2.一種權利要求1所述的生防菌的發酵工藝，其特征在于，將權利要求1所述的生防菌接種于液體的溶菌肉湯培養基中，在26～30℃的條件下，50～500轉/分鐘搖菌1～3天，即得到發酵液。

3.根據權利要求2所述的發酵工藝，其特征在于，還包括前處理步驟：先將權利要求1所述的生防菌接種于溶菌肉湯培養基上26～30℃下活化培養1～6天。

4.一種如權利要求1所述的生防菌的發酵物活性成分的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，采用權利要求2～3任意一項所述的發酵工藝制得發酵液，然后離心除去菌體，得到無菌發酵液；

步驟2，無菌發酵液用正丁醇萃取，取萃取液，濃縮除去正丁醇，即得。

5.一種權利要求1所述的生防菌的發酵物活性成分的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.采用權利要求2～3任意一項所述的發酵工藝制得發酵液，然后離心除去菌體，得到無菌發酵液；

b，無菌發酵液用鹽酸調節pH值至1.5～3，1～10℃下靜置至少3h；

c，離心，棄去上清液，取沉淀，即得。

6.一種權利要求1所述的生防菌的發酵物活性成分的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)采用權利要求2～3任意一項所述的發酵工藝制得發酵液，然后離心除去菌體，得到無菌發酵液；

2)緩慢加入飽和硫酸銨，沉淀蛋白，1～10℃下靜置至少3h；

3)離心得到沉淀，待沉淀干燥后用1/5～1/20原發酵液體積的、pH值為6～8的Tris-HCl溶解沉淀，即得。

7.權利要求1所述的生防菌在制備脂肽類抑菌制劑中的應用。

8.權利要求1所述的生防菌在制備防治植物真菌病害制劑中的應用，其中，所述植物真菌病害為番茄早疫病、西瓜枯萎病、香蕉枯萎病、棉花枯萎病、橡膠炭疽病、橡膠樹棒孢霉落葉病、茶輪斑病、芒果炭疽病、和/或橡膠褐根病中的一種或多種。