[發明專利]一種具有抑制神經細胞凋亡作用的金納米粒復合物及其應用

有效

• 申請號: 201510060179.4
• 申請日: 2015-02-05
• 公開（公告）號: CN104667297B
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 關燕清;陳曉輝
• 申請（專利權）人: 華南師范大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K38/18;A61K9/14;A61K47/02;A61K47/36;A61P25/28;A61P25/16
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明屬于基因治療藥物領域。更具體地，涉及一種具有抑制神經細胞凋亡作用的金納米粒復合物及其應用。

背景技術

帕金森病（Parkinson’s disease，PD），是一種進行性神經系統障礙疾病，主要以中腦黑質紋狀體的多巴胺能神經元退化和神經遞質多巴胺的減少為主要特征。當多巴胺合成減少時，抑制乙酰膽堿的功能降低，兩者失衡結果出現“震顫麻痹”。據統計，對于PD，年齡在45歲以下的發病率較低，75～85歲的發病率為3.1%，85歲以上的發病率達到了4.3%。目前，與帕金森病有關的蛋白在脂質-囊泡動力學（α-synuclein，α-突觸核蛋白），泛素-蛋白酶體系統（parkin and UCHL1），促分裂原活化蛋白激酶信號通路（LRRK2），氧化應激和線粒體功能（DJ1, PINK1, parkin）以及微管穩定（tau）中扮演著重要的角色。很明顯，由于這些功能都能夠導致多巴胺能神經元功能紊亂和死亡，所以這些不同的功能一定存在著部分重疊。但是，這些功能之間并不存在直接的聯系，而且它們之間的連接也是非常不明顯的。有幾條通路可能會說明它們之間的聯系：SNCA（編碼α-synuclein的基因）發生突變，會導致α-synuclein單體在細胞質內的積累量增加，從而形成對細胞有毒的α-synuclein低聚體，一方面會造成多巴胺能神經元死亡，另一方面會促使路易小體的形成和破壞線粒體的功能，導致神經元細胞死亡。由于α-synuclein的功能發生變化，破壞囊泡的運輸，多巴胺釋放受阻，產生活性氧，從而導致神經元細胞死亡。

其中，α-突觸核蛋白（α-synuclein）在帕金森病的病理生理學中處于一個重要的地位，它的過表達對帕金森病的體內和體外模型都會產生毒性。它是一個有140個氨基酸的蛋白質，研究顯示其涉及到帕金森癥的發病機制中。有研究表明，編碼α-synuclein基因的三個錯義突變（A53T, A30P, E46K）導致了帕金森病的常染色體顯性遺傳形式。聚合的α-synuclein是路易小體和路易神經突觸的主要成分，PD病理學指標。盡管α-突觸核蛋白精確的功能還不知道，但是越來越多的證據說明，α-突觸核蛋白的表達水平在PD的發病機理中是非常重要的。最近的研究已經顯示，嚴重的PD病人在中腦黑質紋狀體處，α-突觸核蛋白的mRNA含量增加。與此同時，早期和晚期的帕金森患者也是通過α-突觸核蛋白的過表達程度進行區分的。另外，α-突觸核蛋白的過表達在體外實驗和體內實驗中證明都是有毒的。這些現象說明，α-突觸核蛋白的結構突變和表達水平上調導致了多巴胺能神經元細胞的死亡和退化，針對PD患者，通過靶向降低α-突觸核蛋白表達的治療策略，可能會影響多巴胺能神經元細胞死亡的過程。

帕金森病是一種神經退行性疾病，當前還沒根本的治療方法。針對PD主要有三種治療的方法：1）手術治療：通過移植多巴胺能神經元細胞，來降低用藥量，但是并不能從根本上解決問題；2）藥物治療：左旋多巴胺、兒茶酚轉移酶抑制劑、多巴胺受體激動劑、單胺氧化酶B、谷氨酸-N-甲基-D-天冬氨酸拮抗劑、酶抑制劑等藥物；然而，疾病的持續惡化是不可避免的，病人很快就會出現運動性障礙，如步伐紊亂、癡呆等；3）基因治療：RNA干擾特定蛋白的表達；該方法目前研究比較多，因為RNAi可以通過干擾基因轉錄為相應的蛋白而沉默特定基因，所以理論上來講，任何基因都可以通過RNAi靶向沉默，這樣就可以為治療疾病提供一個巨大的前景。同時，α-突觸核蛋白的表達情況與帕金森病有關聯，可以作為疾病治療的可行靶點，目前已有幾種抑制α-突觸核蛋白的表達的方法，比如藥物、脯氨酰寡肽酶抑制劑、多肽、shRNA和siRNA，但是這些方法沒有一個是以納米醫學為基礎的。

而針對不同的疾病，納米基因治療的實現是研究的重點和難點。目前，基因治療有三個主要的類型：1）選擇性轉染：載體攜帶著細胞凋亡基因選擇性地進入癌細胞，而不會進入正常細胞；2）特異性表達：凋亡基因被轉入正常細胞和癌細胞中，在癌細胞中特異性的表達，但是在正常細胞里不表達；3）靶向蛋白的分泌：基因進入細胞以后，能夠分泌嵌合體蛋白，靶向癌細胞，從而使癌細胞凋亡。