[發(fā)明專利]利用切芽后的花梗莖段誘導(dǎo)叢生芽快速繁殖蝴蝶蘭的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510060016.6
• 申請(qǐng)日: 2015-01-29
• 公開（公告）號(hào): CN104604687B
• 公開（公告）日: 2017-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郝永麗;高博;胡海波;李杰;王燕春;柴曉嬌;劉莉莉;張曉榮;孟令強(qiáng);曲寶茹;巴圖;賀磊;張金成;鄭偉;崔聰聰;廉宇;趙偉強(qiáng);劉艷春;張姼;琦明玉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于蝴蝶蘭繁殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種利用切芽后的花梗莖段誘導(dǎo)叢生芽快速繁殖蝴蝶蘭的方法。

背景技術(shù)

蝴蝶蘭(Phalaenopsis sp.)屬蘭科蝴蝶蘭屬植物，是在1750年發(fā)現(xiàn)的，大多數(shù)產(chǎn)于潮濕的亞洲地區(qū)，自然分布于阿隆姆、緬甸、印度洋各島、馬來(lái)半島、南洋群島、菲律賓以至中國(guó)臺(tái)灣等低緯度熱帶海島。原生種有70多種，雜交種更是數(shù)不勝數(shù)，其花朵色彩和花紋的變化層出不窮，有白花系、紅花系、粉紅系、黃花系、網(wǎng)紋系、虎斑系、點(diǎn)紋系等品種系列。其花型奇特，姿態(tài)優(yōu)雅，花色絢麗，花期長(zhǎng)久，素有“蘭花皇后”之美譽(yù)，觀賞價(jià)值極高，深受人們喜愛，市場(chǎng)需求量越來(lái)越大。

蝴蝶蘭屬于單莖性氣生蘭，極少發(fā)育側(cè)枝，難以進(jìn)行常規(guī)的無(wú)性繁殖；另外蝴蝶蘭在自然條件下不能完成授粉，很難得到種子，即便進(jìn)行人工授粉獲得種子，其種子內(nèi)不含胚乳，自然條件下也很難萌發(fā)，發(fā)芽率極低，因此蝴蝶蘭也難以利用種子進(jìn)行有性繁殖。目前主要利用組織培養(yǎng)方法進(jìn)行蝴蝶蘭的快速繁殖，屬于蝴蝶蘭的無(wú)性繁殖，也所謂克隆繁殖，蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)可以在短期內(nèi)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)、整齊的蝴蝶蘭幼小植株，具有增殖率高、速度快、不受季節(jié)限制、可周年生產(chǎn)和容易去除病毒等優(yōu)點(diǎn)，適應(yīng)市場(chǎng)的大量需求，也是工廠化育苗的重要途徑。蝴蝶蘭組織培養(yǎng)程序一般為：(1)選取外植體葉片、根、莖尖、花梗等；(2)誘導(dǎo)形成原球莖；(3)原球莖大量增殖；(4)分化出小植株；(5)生根壯苗；(6)溫室移栽。從上述程序(1)中可以看出蝴蝶 蘭組織培養(yǎng)選取的外植體可以為葉片、根、莖尖、花梗等，但上述外植體都對(duì)母株有一定的傷害或者影響母株正常的花期。目前蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)常用的有兩種途徑，一是常規(guī)的花梗誘導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)芽進(jìn)行增殖，該方法如果采用已有花苞但未開花或者正在開花的花梗做為外植體，會(huì)影響蝴蝶蘭正常的花期及觀賞價(jià)值，而且繁殖系數(shù)每?jī)蓚€(gè)月一般為2.0-3.0左右，短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)出的組培苗有限；二是利用種子無(wú)菌播種法進(jìn)行蝴蝶蘭組培苗生產(chǎn)，該方法繁殖出的種苗變異較多，種苗生長(zhǎng)不一致。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種利用切芽后的花梗莖段誘導(dǎo)叢生芽快速繁殖蝴蝶蘭的方法，解決蝴蝶蘭分株較慢，種子自然條件下不易萌發(fā)、植株繁殖速率慢、商品苗生產(chǎn)量低、生長(zhǎng)周期不一致、開花時(shí)間參差不齊，不能大批量控制花期及上市等問(wèn)題。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，以開過(guò)花的蝴蝶蘭花梗腋芽誘導(dǎo)出營(yíng)養(yǎng)芽切芽后的廢棄花梗莖段作為外植體，直接接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的誘導(dǎo)，將誘導(dǎo)出的新芽切下接種到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，最后進(jìn)行生根壯苗及組培苗的移栽。

具體的步驟為：

(1)外植體的選擇：選取無(wú)病蟲害長(zhǎng)勢(shì)良好的蝴蝶蘭品種，待其花朵凋謝，花期已過(guò)，用剪刀將整條花梗剪下，切取3-4cm長(zhǎng)的花梗腋芽莖段(一段一芽)為外植體材料；

(2)培養(yǎng)基的配制：

芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.5mg/L，蔗糖20g/L，pH值為 5.6：

芽增殖培養(yǎng)基：MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L，蔗糖20g/L，pH值為5.6：

生根壯苗培養(yǎng)基：1/2MS+NAA1.0mg/L+香蕉泥100g/L，蔗糖20g/L，pH值為5.6；

(3)外植體消毒處理：將上述外植體材料，自來(lái)水下沖洗30-60min后，在超凈工作臺(tái)內(nèi)，放入75％的酒精溶液中浸泡消毒45S，此后用無(wú)菌濾紙吸干酒精，放入7-10％的NaClO消毒液中消毒滅菌15-20min，然后在無(wú)菌濾紙上將腋芽的苞片小心剝?nèi)ィ俜湃?％的NaClO消毒液中消毒5min，滅菌完畢后用無(wú)菌水沖洗3-5遍，濾紙吸干水分置于培養(yǎng)皿中備用；

(4)誘導(dǎo)培養(yǎng)及培養(yǎng)條件：將嚴(yán)格消毒后的帶腋芽花梗，用無(wú)菌手術(shù)刀將莖段與消毒液接觸的兩端沿45℃角切掉，花梗芽點(diǎn)朝上與培養(yǎng)基平面成45℃角斜插入芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度25±2℃，光照時(shí)間12-14h/d，光照強(qiáng)度為1600-2000Lx，誘導(dǎo)時(shí)間為30-45d左右；

(5)增殖培養(yǎng)及培養(yǎng)條件：將步驟(4)誘導(dǎo)出的新芽從花梗上切下，2-3株為一組，接種到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖，培養(yǎng)條件及培養(yǎng)時(shí)間同步驟(4)：

(6)將步驟(5)中初代切芽后的花梗莖段重新接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，置培養(yǎng)架培養(yǎng)，培養(yǎng)條件及培養(yǎng)時(shí)間同步驟(4)；

(7)將切芽后的花梗莖段二次誘導(dǎo)出的叢生芽從花梗上切下，2-3株為一組，接種到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖，培養(yǎng)條件及培養(yǎng)時(shí)間同步驟(4)；