[發明專利]利用切芽后的花梗莖段誘導叢生芽快速繁殖蝴蝶蘭的方法

有效

• 申請號: 201510060016.6
• 申請日: 2015-01-29
• 公開（公告）號: CN104604687B
• 公開（公告）日: 2017-07-18
• 發明（設計）人: 郝永麗;高博;胡海波;李杰;王燕春;柴曉嬌;劉莉莉;張曉榮;孟令強;曲寶茹;巴圖;賀磊;張金成;鄭偉;崔聰聰;廉宇;趙偉強;劉艷春;張姼;琦明玉
• 申請（專利權）人: 赤峰市農牧科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用切芽后的花梗莖段誘導叢生芽快速繁殖蝴蝶蘭的方法，其特征在于：用開過花的蝴蝶蘭花梗腋芽誘導出營養芽切芽后的廢棄花梗莖段作為外植體，直接接種到誘導培養基中進行叢生芽的誘導，將誘導出的新芽切下接種到增殖培養基中進行繼代增殖培養，最后進行生根壯苗及組培苗的移栽；

具體的步驟為：

(1)外植體的選擇：選取無病蟲害長勢良好的蝴蝶蘭品種，待其花朵凋謝，花期已過，用剪刀將整條花梗剪下，切取3-4cm長的花梗腋芽莖段(一段一芽)為外植體材料；

(2)培養基的配制：

芽誘導培養基：MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.5mg/L，蔗糖20g/L，pH值為5.6；

芽增殖培養基：MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L，蔗糖20g/L，pH值為5.6；

生根壯苗培養基：1/2MS+NAA 1.0mg/L+香蕉泥100g/L，蔗糖20g/L，pH值為5.6；

(3)外植體消毒處理：將上述外植體材料，自來水下沖洗30-60min后，在超凈工作臺內，放入75％的酒精溶液中浸泡消毒45S，此后用無菌濾紙吸干酒精，放入7-10％的NaClO消毒液中消毒滅菌15-20min，然后在無菌濾紙上將腋芽的苞片小心剝去，再放入5％的NaClO消毒液中消毒5min，滅菌完畢后用無菌水沖洗3-5遍，濾紙吸干水分置于培養皿中備用；

(4)誘導培養及培養條件：將嚴格消毒后的帶腋芽花梗，用無菌手術刀將莖段與消毒液接觸的兩端沿45℃角切掉，花梗芽點朝上與培養基平面成45℃角斜插入芽誘導培養基中，培養溫度25±2℃，光照時間12-14h/d，光照強度為1600-2000Lx，誘導時間為30-45d左右；

(5)增殖培養及培養條件：將步驟(4)誘導出的新芽從花梗上切下，2-3株為一組，接種到增殖培養基中進行繼代增殖，培養條件及培養時間同步驟(4)；

(6)將步驟(5)中初代切芽后的花梗莖段重新接種到誘導培養基中，置培養架培養，培養條件及培養時間同步驟(4)；

(7)將切芽后的花梗莖段二次誘導出的叢生芽從花梗上切下，2-3株為一組，接種到增殖培養基中進行繼代增殖，培養條件及培養時間同步驟(4)；

(8)重復步驟(6)和步驟(7)2-3次；

(9)生根壯苗及培養條件：當增殖得到的芽體達到2-5cm高時，無菌條件下，將叢生芽分離成單株，接種在生根壯苗培養基中進行生根壯苗，培養條件同步驟(4)，生根壯苗時間為2-3個月；

(10)組培苗煉苗及移栽：當組培苗長至3-5cm高，有2-5條根，3-6片葉，葉長2-3cm時，即可進行煉苗，將組培瓶放在自然光照條件下煉苗5-7天，打開組培瓶蓋繼續煉苗2-3天，以增強瓶苗對室外環境的適應能力；再從瓶中小心取出組培苗，洗凈根部培養基，用滅過菌的水苔輕裹根部植于36孔穴盤中，保持溫度25℃左右，空氣濕度80-85％，25-30天后，有新根新葉長出時，定期噴施多菌靈1000倍液。