[發明專利]高產淀粉酶紫色紅曲霉（Monascuspurpureus）Mp?42菌株及其應用

有效

• 申請號: 201510059990.0
• 申請日: 2015-02-05
• 公開（公告）號: CN104630076B
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 蔣冬花;吳巧玉;馮青青
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/30;C12R1/645
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司33214
• 代理人: 王從友

技術領域

本發明屬于生物技術微生物領域，涉及1株液體發酵生產淀粉酶的紫色紅曲霉Mp-42菌株及其應用。

背景技術

紅曲霉（Monascus）是我國重要的食用、藥用真菌，是傳統中藥紅曲的基原菌，也是制作傳統飲品紅曲酒的主要菌種，在我國已有上千年的應用歷史。被廣泛應用于食品發酵、食品著色、中藥配伍等方面。紅曲霉在生長過程中能產生多種酶，如淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、脂肪酶等。淀粉酶是水解淀粉和糖原酶類的總稱，是一類重要的工業用酶，可用于如淀粉類食品或肉類制品生產加工過程，淀粉酶可以將淀粉水解形成糊精、低聚糖和葡萄糖等低分子物質，可改善制品的風味，生成的葡萄糖的產物又可以進一步異構化成果糖，得到商品化的高果糖漿；淀粉酶還能水解淀粉生產糖漿，利用如稻米和高粱等含淀粉的谷物及土豆來生產乙醇和酒類等。

發明內容

本發明的一個目的是提供1株高產淀粉酶紅曲霉（Monascus purpureus）Mp-42菌株。本發明所涉及的紫色紅曲霉Mp-42菌株具有高產淀粉酶，生長速度快、產孢量多等優良特性。本發明的第二個目的是提供上述的Mp-42菌株的應用。

為了實現上述的第一個目的，本發明采用了以下的技術方案：

本發明所述紫色紅曲霉（Monascus purpureus）Mp-42菌株，保藏編號為：CCTCC M 2014675，保藏地為：中國典型培養物保藏中心，保藏日期為：2014年12月29日。

本發明Mp-42菌株的菌落特征：PDA培養基上的菌落初期為白色絨毛狀，4 d后中心菌絲開始變紅色，氣生菌絲密而短小，培養15 d后色澤變為橘紅色，邊緣呈白色，菌落直徑達54 mm（附圖1）；在淀粉分離培養基上30 ℃培養7 d后，菌落直徑為2.58 cm，添加碘液染色，菌落透明圈大小為1.85 cm，在淀粉分離培養基上菌落呈輻射狀、裂紋比較密集，邊緣光滑呈淡褐色，皮膜狀，正面從里到外顏色均為淡黃，微微隆起（附圖2）。

Mp-42菌株的顯微特征：顯微鏡觀察菌絲光滑，有隔膜，直徑4~6 μm的分支狀，有深淺不一的紅褐色色素顆粒；分生孢子球形或倒梨形，單生或成鏈，直徑5~8 μm；閉囊殼呈球形，囊內孢子可見，子囊孢子橢球形，直徑4~7 μm，透明淡紅色或無色（附圖3）。

Mp-42菌株的生理生化特征：該菌株適宜生長溫度范圍為26℃~38℃，適宜pH生長范圍為4.0~8.0。能夠很好的利用各種有機碳源，如可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、番薯粉等；在氮源利用方面，可利用硝酸鈉、氯化銨、硝酸銨等無機氮源和牛肉膏、酵母粉、蛋白胨等多種有機氮源；Mp-42菌株能夠高產淀粉酶。

ITS基因序列分析結果表明，其長度為604 bp（附圖4），與紫色紅曲霉的相似度達99%（附圖5）。根據Mp-42形態特征，結合李鐘慶和郭芳紅曲菌分種檢索表，將Mp-42菌株鑒定為紫色紅曲霉（Monascus purpureus）。

為了實現上述的第二個目的，本發明采用了以下的技術方案：

上述的紫色紅曲霉Mp-42菌株用于生產淀粉酶中的應用。

作為優選，所述的生產的有機碳源采用可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖和番薯粉中的一種或多種；氮源采用硝酸鈉、氯化銨、硝酸銨、牛肉膏、酵母粉和蛋白胨中的一種或多種。

作為優選，所述的生產的溫度范圍為26℃~38℃，pH范圍為4.0~8.0。作為最優選，所述的生產的pH為6.0，溫度為30℃。

本發明的Mp-42菌株具有高產淀粉酶，生長速度快、產孢量多等優良特性。在發酵培養基初始pH為6.0，培養溫度為30℃條件下，Mp-42菌株淀粉酶酶活可達168 U/mL~178 U/mL。紅曲霉在食品藥品生產中已獲得了長期的實踐證明，其生產和應用均不存在安全隱患，Mp-42菌株可用于淀粉酶的生產、食品加工和釀酒制醋等，為以后工業發酵生產和應用提供優良菌種。

附圖說明

圖1為Mp-42菌株在PDA培養基上培養15 d菌落正面。

圖2 為Mp-42菌株在淀粉分離培養基上培養7 d的菌落；左：培養7 d菌落正面；右：培養7 d加碘液染色后菌落正面， ：透明圈。

圖3為Mp-42菌株顯微特征（400 X）；左：菌絲及分生孢子，右：閉囊殼及子囊孢子。

圖4為Mp-42 菌株ITS基因序列（604 bp）。

圖5為基于ITS基因序列建立的紅曲霉屬（Monascus）系統發育樹 。