[發明專利]一種藍耳病疫苗抗原純化的方法有效
| 申請號: | 201510056212.6 | 申請日: | 2015-02-03 |
| 公開(公告)號: | CN104673761B | 公開(公告)日: | 2017-07-18 |
| 發明(設計)人: | 黃文強;丁錦茂;潘德春;楊君敬;吳宗學;王賀民 | 申請(專利權)人: | 乾元浩生物股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N7/04 | 分類號: | C12N7/04 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100070 北京市豐臺區南*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 藍耳病 疫苗 抗原 純化 方法 | ||
1.一種藍耳病疫苗抗原純化的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將收獲的藍耳病疫苗抗原經離心機離心澄清,收取澄清的抗原液;所述的藍耳病疫苗抗原為經滅活劑滅活后的藍耳病滅活疫苗抗原或藍耳病活疫苗抗原;
其中,步驟(1)采用差速離心的方法,所述差速離心為先采用4000-7000rpm離心20-40min,取上清棄沉淀,然后將上清液以8000-12000rpm離心50-70min,取上清備用;
(2)將步驟(1)得到的澄清抗原液泵入超濾系統進行純化;
其中,步驟(2)中超濾系統為切向流超濾系統,所述切向流超濾系統膜包的分子量大小為300KD;抗原液泵入超濾系統進行純化時,抗原液循環進入超濾膜包的流速不超過0.8ml/min/cm2,純化的同時需要將抗原液濃縮至原體積1/10以上,收取回流液,棄去透過液;
(3)用0.01M pH值7.2-7.4的PBS緩沖液將步驟(2)中純化得到的抗原液稀釋至原體積繼續純化,純化方法同步驟(2);
(4)用0.01M pH值7.2-7.4的PBS緩沖液將步驟(3)中純化得到的抗原液稀釋至原體積繼續純化后,收獲純化的藍耳病疫苗抗原。
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