[發(fā)明專(zhuān)利]石墨烯/類(lèi)過(guò)氧化物酶雙信號(hào)放大檢測(cè)白血病的生物傳感方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510053919.1
• 申請(qǐng)日: 2015-02-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104597240A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙永祥;蘇婧;盧小玲;黃勇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣西醫(yī)科大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/574
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/574;G01N33/553
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種用于白血病細(xì)胞檢測(cè)的試劑盒，含有如下(a)和(b)：

(a)磁珠捕獲探針；

所述磁珠捕獲探針由磁珠和固定于所述磁珠上的捕獲探針組成；所述捕獲探針為序列表中序列1所示的單鏈DNA分子；

(b)適配體功能化Hemin-石墨烯復(fù)合納米材料；

所述適配體功能化Hemin-石墨烯復(fù)合納米材料由經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯和固定于所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯上的適配體探針組成；所述適配體探針為序列表中序列2所示的單鏈DNA分子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述適配體功能化Hemin-石墨烯復(fù)合納米材料是按照包括如下步驟的方法制備得到的：按照所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯與所述適配體探針的配比為0.5mg：4-40nmol的比例，將所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯的懸濁液與所述適配體探針的溶液混合，20-25℃避光孵育16-24h，得到所述Hemin-石墨烯復(fù)合納米材料。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于：在進(jìn)行所述20-25℃避光孵育16-24h的期間，還包括向孵育體系中加入NaCl得到含NaCl體系，NaCl在所述含NaCl體系中的濃度為10mM的步驟。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的試劑盒，其特征在于：所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯是將氧化石墨烯和氯化高鐵血紅素按照質(zhì)量比為1：(1～10)的比例制備得到的。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯是按照包括如下步驟的方法制備得到的：將氧化石墨烯和氯化高鐵血紅素按照質(zhì)量比為1：(1～10)的比例混合后，加入氨水和水合肼，60℃孵育2～6h，得到所述經(jīng)氯化高鐵血紅素修飾的石墨烯。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的試劑盒，其特征在于：所述磁珠捕獲探針按照包括如下步驟的方法制備得到：將經(jīng)生物素標(biāo)記的所述捕獲探針與經(jīng)鏈霉親和素標(biāo)記的所述磁珠共同孵育，獲得所述磁珠捕獲探針。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于：進(jìn)行所述孵育時(shí)，經(jīng)生物素標(biāo)記的所述捕獲探針與經(jīng)鏈霉親和素標(biāo)記的所述磁珠的配比為100pmol：1mg；或

所述孵育為20-30℃震蕩孵育10-30min；或

所述孵育是在結(jié)合緩沖液中進(jìn)行的；所述結(jié)合緩沖液的溶劑為水，溶質(zhì)及濃度如下：Tris?0.605g/L，EDTA?0.185g/L，NaCl?58.45g/L；所述結(jié)合緩沖液的pH值為7.5。