[發明專利]一種培養Marc?145細胞用的培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201510050944.4
• 申請日: 2015-01-30
• 公開（公告）號: CN104630132B
• 公開（公告）日: 2017-11-14
• 發明（設計）人: 徐家華;陳瑞愛;蔣春英;張東霞;王新秋
• 申請（專利權）人: 肇慶大華農生物藥品有限公司;廣東溫氏大華農生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙)44288
• 代理人: 羅偉添

1.一種培養Marc-145細胞用的培養基，其特征在于由如下成分組成：DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清；

所述DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清的體積比為：酶解明膠溶液：氨基酸DMEM溶液：胎牛血清：DMEM=1-2:1-5:2-5:100；

所述酶解明膠溶液中的蛋白質濃度為20-80mg/ml，所述酶解明膠溶液中的溶劑為PBS溶液；

所述氨基酸DMEM溶液中的溶劑為DMEM，溶質由按照質量體積比計的如下組分組成：丙氨酸5-35mg/L、精氨酸10-60 mg/L、天門冬酰胺5-25 mg/L、天冬氨酸15-80 mg/L、胱氨酸5-30 mg/L、谷氨酸50-100 mg/L、谷氨酰胺40-80 mg/L、甘氨酸5-20 mg/L、組氨酸5-10 mg/L、異亮氨酸5-15 mg/L、亮氨酸10-20 mg/L、賴氨酸10-25 mg/L、甲硫氨酸10-30 mg/L、苯丙氨酸5-20 mg/L、脯氨酸10-40 mg/L、絲氨酸10-30 mg/L、蘇氨酸10-40 mg/L、色氨酸5-80mg/L、酪氨酸10-50 mg/L、纈氨酸10-20 mg/L、羥基脯氨酸5-10 mg/L、高半胱氨酸2-10 mg/L、牛磺酸5-15 mg/L；

所述酶解明膠溶液為胰酶酶解明膠溶液，所述PBS溶液用超純水配制而成。

2.根據權利要求1所述的培養Marc-145細胞用的培養基，其特征在于：所述DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清的體積比為：酶解明膠溶液：氨基酸DMEM溶液：胎牛血清：DMEM=1-2:1-5:2-3:100。

3.根據權利要求1所述的培養Marc-145細胞用的培養基，其特征在于：所述DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清的體積比為：酶解明膠溶液：氨基酸DMEM溶液：胎牛血清：DMEM=1:2:2-5:100；

所述氨基酸DMEM溶液中的溶質按照質量體積比計的如下組分：丙氨酸5mg/L、精氨酸10mg/L、天門冬酰胺5mg/L、天冬氨酸15 mg/L、胱氨酸5 mg/L、谷氨酸50mg/L、谷氨酰胺40 mg/L、甘氨酸5 mg/L、組氨酸5 mg/L、異亮氨酸5 mg/L、亮氨酸10 mg/L、賴氨酸10 mg/L、甲硫氨酸10mg/L、苯丙氨酸5mg/L、脯氨酸10 mg/L、絲氨酸10 mg/L、蘇氨酸10 mg/L、色氨酸5 mg/L、酪氨酸10mg/L、纈氨酸10 mg/L、羥基脯氨酸5 mg/L、高半胱氨酸2 mg/L和牛磺酸5 mg/L。

4.根據權利要求1所述的培養Marc-145細胞用的培養基，其特征在于：所述DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清的體積比為：酶解明膠溶液：氨基酸DMEM溶液：胎牛血清：DMEM=1:2:2-5:100；

所述氨基酸DMEM溶液中的溶質由按照質量體積比計的如下組分：丙氨酸8mg/L、精氨酸12 mg/L、天門冬酰胺9 mg/L、天冬氨酸20 mg/L、胱氨酸7mg/L、谷氨酸60 mg/L、谷氨酰胺50mg/L、甘氨酸10mg/L、組氨酸8 mg/L、異亮氨酸8 mg/L、亮氨酸12 mg/L、賴氨酸12mg/L、甲硫氨酸15 mg/L、苯丙氨酸6mg/L、脯氨酸10mg/L、絲氨酸10mg/L、蘇氨酸10mg/L、色氨酸5mg/L、酪氨酸13 mg/L、纈氨酸10mg/L、羥基脯氨酸6 mg/L、高半胱氨酸5 mg/L和牛磺酸6mg/L。

5.一種根據權利要求1所述的培養Marc-145細胞用的培養基的制備方法，其特征在于：根據配方的體積比分別量取DMEM、酶解明膠溶液、氨基酸DMEM溶液和胎牛血清，混合，得到培養基。

6.根據權利要求5所述的培養Marc-145細胞用的培養基的制備方法，其特征在于所述氨基酸DMEM溶液由如下方法制成：取配方量的丙氨酸、精氨酸、天門冬酰胺、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、羥基脯氨酸、高半胱氨酸、牛磺酸，然后溶解在配方量的DMEM溶液中，得到氨基酸DMEM溶液。