[發明專利]一種養血安神藥物的質量控制方法

在審

• 申請號: 201510047559.4
• 申請日: 2015-01-30
• 公開（公告）號: CN104833661A
• 公開（公告）日: 2015-08-12
• 發明（設計）人: 徐建;王婷婷;白冰;徐云;付成國;任晶;趙俞;關麗丹
• 申請（專利權）人: 吉林修正藥業新藥開發有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/28
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司 22204
• 代理人: 孫國振

1.一種養血安神藥物的質量控制方法，包括鑒別和含量測定，其特征是：

（1）鑒別

①酸棗仁鑒別

取待檢藥物適量，加甲醇10～30ml，超聲處理10～30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10～30ml使溶解，用乙醚萃取三次，每次20ml，水相用水飽和正丁醇提取兩次，每次15ml，合并提取液，用正丁醇飽和氨試液萃取兩次，每次20ml，正丁醇層蒸干，殘渣加甲醇0.5～2ml溶解，作為供試品溶液，另取酸棗仁皂苷A、B對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的混合溶液，作為對照品溶液，再取酸棗仁對照藥材0.5～1g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI?B)試驗，吸取上述三種溶液各2～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（2～5：1：4～10）（體積比）的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴以2%香草醛硫酸乙醇溶液(取硫酸1ml加乙醇定容至10ml)，在100℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

②甘草鑒別

取待檢藥物適量，加水10～40ml，用氨試液調pH值至9，超聲處理10～30分鐘，離心（3000rpm、20分鐘），取上清液加硫酸調pH至2，靜置2小時，離心（3000rpm、20分鐘），棄去上清液，沉淀加水10～40ml及鹽酸2ml，加熱回流10～40分鐘，放冷，用氯仿提取兩次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加0.5～1.5?ml氯仿使溶解，作為供試品溶液，另取甘草次酸對照品，加氯仿制成每1ml含0.5～1.5?ml的溶液，作為對照品溶液，另取甘草對照藥材0.5～1g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI?B)試驗，吸取上述三種溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠GF₂₅₄薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（10～20：4：1.5）（體積比）為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

③川芎鑒別

取待檢藥物適量，置具塞錐形瓶中，加水10～30ml，加熱至約60℃，振搖至無明顯顆粒，趁熱加石油醚（沸程60-90℃）40ml，密閉，振搖2～10分鐘，超聲處理10～30分鐘，分取石油醚提取液，揮干，殘渣加乙醚0.5～1.5?ml溶解，作為供試品溶液，另取川芎對照藥材粉末1g，加石油醚20ml，超聲波處理10～30分鐘，濾過，揮干，殘渣加乙醚0.5～1.5?ml溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI?B)試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯（2～10：1）（體積比）為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

④知母鑒別

取待檢藥物適量，加乙醚30～50ml，超聲處理10～30分鐘，濾過，殘渣揮盡乙醚，加乙醇30ml及濃鹽酸3ml，回流水解1小時，水解液濃縮至約10ml，加水10～30ml，用甲苯20ml提取，提取液蒸干，殘渣加甲苯0.5～1.5?ml溶解，作為供試品溶液，另取菝葜皂苷元對照品，加甲苯制成每1ml含0.5～1.5?ml的溶液，作為對照品溶液，另取知母對照藥材0.5～1g，照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI?B)試驗，吸取上述三種溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮（5～10：1）（體積比）為展開劑，展開，取出，涼干，噴以8%香草醛無水乙醇溶液與硫酸溶液（取硫酸7ml加無水乙醇至10ml）的混合液（0.5:5）（體積比），在100℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

⑤茯苓鑒別

取待檢藥物適量，加乙醚30～50ml，超聲處理10～30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5～1.5ml溶解，作為供試品溶液，另取茯苓對照藥材粉末0.5～1.5g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI?B)試驗，吸取上述兩種溶液各5～8μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-丙酮-乙酸乙酯（80～85：15:1）（體積比）為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

（2）含量測定

①色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水（40～60：40～60）（體積比）為流動相；檢測波長為250nm，理論板數按五味子醇甲峰計算應不低于4000；

②對照品溶液的制備：精密稱取五味子醇甲對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.01～0.05mg的溶液，即得；

③供試品溶液的制備：取待檢藥物0.1～2g，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇約40ml，超聲處理15～30分鐘（功率250W，頻率20KHZ），以甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；

④測定法：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10～20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。