[發明專利]一種海菜花種苗組培快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201510040301.1
• 申請日: 2015-01-27
• 公開（公告）號: CN104604683A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 唐鳳鸞;黃寧珍;何金祥;趙健;付傳明;冼康華;仇碩;黃惠錦
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

1.一種海菜花種苗組培快速繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將處理干凈的海菜花果實置于100～200?mg/L的甲基托布津溶液浸泡0.3～1?h，自來水沖洗干凈后，在超凈工作臺上先用70～75%(v/v)酒精浸泡1～2?min，再用濃度為0.1～0.2%(w/v)升汞浸泡15～20?min，無菌水沖洗5～6遍，獲得無菌果實；

（2）將步驟（1）獲得的無菌果實用手術刀縱向切開，選取種皮為黑色或褐色的種子接到萌發培養基中進行培養形成幼芽；

（3）以步驟（2）獲得的無菌幼芽為材料，去除胚根和葉片后，轉接到繼代增殖培養基中進行增殖培養，獲得叢生芽；

（4）經過增殖擴繁后，將植株高度達到4?cm的小苗轉接到生根培養基上進行生根培養，獲得完整試管苗；

（5）將完整試管苗直接在水質良好的水域中進行移栽定植；

其中，所述萌發培養基為：MS、6-BA?0.5～2.0?mg/L、NAA?0.1～0.5?mg/L、瓊脂4.5～6.0?g/L、蔗糖30?g/L，pH為5.8～6.2；

所述繼代增殖培養基為：改良MS、6-BA?1.0～2.0?mg/L、KT?0.5～1.0?mg/L、NAA?0.1～0.5?mg/L、酸水解酪蛋白0.2～0.5?g/L、椰子汁100～200?mg/L、蔗糖20?g/L、瓊脂4.5～6.0?g/L，pH為5.8～6.2；

所述生根培養基為：改良MS、NAA0.1～0.2?mg/L、蔗糖30?g/L、瓊脂4.5～6.0?g/L，pH為5.8～6.2。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中所述萌發培養基表面加4～6?cm的無菌水；培養條件：溫度28±2℃的暗培養。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）、（4）中所述培養基表面加4～6?cm的無菌水；培養條件：光照強度2000?lux，光照時間10±2?h/d?，溫度?25±2℃。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）、（4）中所述的改良MS為：(1)?NH₄NO_3?1650?mg/L、(2)KNO_3?1900?mg/L、(3)CaCl₂﹒2H₂O?440?mg/L、(4)MgSO₄﹒7H₂O?370?mg/L、(5)KH₂PO₄?170?mg/L、(6)Na₂-EDTA?37.3?mg/L、(7)FeSO₄﹒7H₂O?27.8?mg/L、(8)MnSO₄﹒4H₂O?22.3?mg/L、(9)ZnSO₄﹒7H₂O?8.6?mg/L、(10)H₃BO₃?6.2?mg/L、(11)KI?0.83?mg/L、(12)Na₂MoO₄﹒2H₂O?0.25?mg/L、(13)CuSO₄﹒5H₂O?0.025?mg/L、(14)CoCl₂﹒6H₂O?0.025?mg/L、(15)鹽酸硫胺素VB₁?0.3?mg/L、(16)煙酸0.5?mg/L、(17)肌醇100?mg/L、(18)甘氨酸2?mg/L。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述甲基托布津的濃度為150?mg/L，浸泡時間為0.3?h；酒精濃度為70%(v/v)，浸泡時間為2?min；升汞濃度為0.2%(w/v)，浸泡時間為15?min。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述種子萌發培養基為：MS、6-BA?1.0?mg/L、NAA?0.1?mg/L、瓊脂5.5?g/L、蔗糖30?g/L，pH為5.8。