[發明專利]一種針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法有效
| 申請號: | 201510039583.3 | 申請日: | 2015-01-26 |
| 公開(公告)號: | CN104645338B | 公開(公告)日: | 2018-05-04 |
| 發明(設計)人: | 何丹農;夏智偉;王萍;嚴一楠;劉婷;金彩虹 | 申請(專利權)人: | 上海交通大學;上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司 |
| 主分類號: | A61K47/64 | 分類號: | A61K47/64;A61K31/704;A61P35/00 |
| 代理公司: | 上海漢聲知識產權代理有限公司31236 | 代理人: | 徐紅銀,郭國中 |
| 地址: | 200240 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 針對 腫瘤 dna 靶向 納米 分子 制備 方法 | ||
1.一種針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括如下:
步驟一、將DNA單鏈加入Tris-MgCl溶液中混合、反應,得DNA四面體溶液;
步驟二、將所述DNA四面體溶液和靶肽溶液加入到PBS溶液、CuSO4溶液、三(2-羧乙基)膦溶液、叔丁基三氯乙酰亞胺酯溶液的混合溶液中,恒溫發生點擊反應,即得靶向DNA四面體溶液;
步驟三、向所述靶向DNA四面體溶液中加入腫瘤藥物,恒溫震蕩,離心,去上清,所得沉淀即為DNA靶向納米載藥分子;
所述腫瘤藥物與靶向DNA四面體的摩爾比大于40:1;
步驟一中,所述反應具體為:在PCR儀中,反應溫度為95℃,10分鐘后快速冷卻至4℃,繼續反應30分鐘;
步驟三中,所述腫瘤藥物為阿霉素;
所述制備方法還包括將步驟三所述的DNA靶向納米載藥分子重懸在100μL PBS溶液中;所述PBS溶液的pH為7.4。
2.根據權利要求1所述的針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,步驟一中,所述DNA單鏈為可通過堿基互補配對自組裝成DNA四面體三維構型的DNA單鏈。
3.根據權利要求2所述的針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,所述DNA單鏈的序列如TSP-1、TSP-2、TSP-3、TSP-4所示;
所述TSP-1的序列如SEQ ID No.1所示,所述TSP-2的序列如SEQ ID No.2所示,所述TSP-3的序列如SEQ ID No.3所示,所述TSP-4的序列如SEQ ID No.4所示。
4.根據權利要求1所述的針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,步驟二中,所述靶肽溶液中靶肽的序列包括RGERPPR或GNKRTRG。
5.根據權利要求1所述的針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,步驟二中,所述點擊反應的條件具體為:37℃、175rpm震蕩5小時。
6.根據權利要求1所述的針對腦腫瘤的DNA靶向納米載藥分子的制備方法,其特征在于,步驟三中,所述恒溫震蕩的條件具體為:37℃、175rpm震蕩3小時。
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