[發明專利]一種無創制作肺纖維化動物模型的方法

在審

• 申請號: 201510038225.0
• 申請日: 2015-01-26
• 公開（公告）號: CN104605958A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 孫增濤;鄭兆曄;廉富;楊曉敏;閆博;劉恩順;祁海燕;李美鳳;封繼宏
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學第二附屬醫院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00
• 代理公司: 四川君士達律師事務所 51216
• 代理人: 芶忠義

1.一種無創制作肺纖維化動物模型的方法，其特征在于，包括以下步驟：

采用內窺鏡引導下氣管內灌注的滴注菌液方式，設備采用鼻0度4#硬式內窺鏡、氙燈冷光源及松下KS-822攝錄監視系統；

將大鼠置于直徑為26cm的干燥器內乙醚麻醉，麻醉滿意后迅速將鼠從麻醉器中取出，呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上；

兩名操作者并排位于鼠頭頂方向，首先助手以左手持鼠麻醉喉鏡，自鼠上唇齒伸入口腔、提壓鼠舌，伸至鼠會厭緣處時提拉鼠舌根，以右手持牽拉套圈，套住鼠上列長尖牙門齒，左右手同時相反方向上下牽拉舌根與長尖牙門齒，使鼠自唇齒至喉部間上呼吸暢通暴露聲門區域，此時主操作者以左手持0度硬式內窺鏡，右手持7號長針注射器，內裝定量造模所用肺炎鏈球菌菌懸液，在監視器顯示引導下將7號長注射針插入氣管內，并深入聲門下15～20mm，此時觀察鼠的聲帶活動情況，當雙側聲帶由內收狀向外展狀變化時，迅速推注藥物博來霉素200μl入氣管內，使藥物隨吸氣時的氣流充分進入支氣管內，推注完畢后，將鼠板迅速立起鼠頭在上左右翻轉15～20秒，利用體位及重力作用，使藥物充分能夠達到細支氣管以提高造模藥物肺部覆蓋面從暴露氣道至推注藥物完成時間用20～30秒；空白組不做處理，鹽水對照組注入同等量的無菌生理鹽水；每7天滴入一次，共2次；

解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，鼠復蘇時間30～60秒，然后置于恒溫動物房飼養；接種后每日觀察其活動、取食、精神的一般情況，記錄相應數據。

2.根據權利要求1所述的無創制作肺纖維化動物模型的方法，其特征在于，所述博來霉素的濃度為2.5mg/ml。